Resumen de Sequenciacio de gens de protamina p1 de mamifer. Identificacio en la regio promotora de regions conservades potencialment reguladores de la seva expressio de gens p1

Rosa Queralt Montañola

• PARA PODER DETECTAR SECUENCIAS DE DNA CONSERVADAS, REGULADORAS DE LA EXPRESION DEL GEN DE PROTAMINA P1, HEMOS SECUENCIADO LA REGION PROMOTORA DEL GEN P1 DE DOS ROEDORES Y DE CUATRO PRIMATES QUE FUERON COMPARADOS CON LA REGION HOMOLOGA DEL GEN DE PROTAMINA P1 HUMANA, DE RATON, DE TORO Y DE JABALI. NOSOTROS HEMOS DEMOSTRADO LA PRESENCIA DE UNA SECUENCIA CONSENSUS, HSMCYTCAYAAT (PROT1C: PROTAMINE 1 CONSENSUS) DE LA POSICION -64 A LA POSICION -53 EN TODOS LOS GENES DE PROTAMINA P1 CONOCIDOS HASTA LA FECHA. OTRA SECUENCIA ALTAMENTE CONSERVADA TGTGAGG HA SIDO IDENTIFICADA 20+-3 NT EN EL EXTREMO 5' DE LA REGION PROT1C. ESTA SECUENCIA FORMA UN PALINDROME PERFECTO CON EL CENTRO DE SIETE NUCLEOTIDOS DE LA SECUENCIA PROT1C Y QUE SE ENCUENTRA AUSENTE EN LA REGION HOMOLOGA DE OTROS GENES. EN EL EXTREMO 5', EN LA POSICION -113 A -132, UNA TERCERA REGION ALTAMENTE CONSERVADA ES LA (MATGCCCATATWTGGRCAYG) LA CUAL ES ALTAMENTE SIMILAR CON EL SRE (SERUM-RESPONSE ELEMENT) DEL PROTO- ONCOGEN C-FOS Y CONTIENE LA REGION CENTRAL COMUN A TODOS LOS SRE'S (R. QUERALT AND R. OLIVA. (1993) GENE. 133, 197- 204). CON LA TECNICA DE RETARDACION EN GEL SE HAN IDENTIFICADO DISTINTAS PROTEINAS ESPECIFICAS DE DISTINTA MOVILIDAD CON LOS EXTRACTOS NUCLEARES DE TESTICULO MADURO, RIÑON, CEREBRO, BAZO E HIGADO DE RATA QUE SE UNEN A LAS SECUENCIAS PROT1C Y SRE. IN VITRO DNASE I FOOTPRINTING DEMUESTRA PROTECCION EN LA REGION DEL SRE EN LA POSICION -124 A -115. ADEMAS, HEMOS DETECTADO PROTECCION EN DOS NUEVAS REGIONES ADYACENTES AL SRE QUE HEMOS LLAMADO SAP (SRE ADJOINING PROTECTION; -153 A -141) Y SEP (SRE EXTENDED PROTECTION; DE -114 A -100) RESPECTIVAMENTE. EN ADICION HEMOS DETECTADO OTRAS DOS NUEVAS REGIONES EN LAS POSICIONES +27 A +46 Y +61 A +30, LA PRIMERA DE LAS CUALES CONTIENE LA SECUENCIA +42 TCGNNNNNGCCAA +30 RECONOCIDA POR EL FACTOR NUCLEAR I (NFI) (QUERALT R. AND OLIVA R. (1995) BBRC. 208, 802-812).