HIPOTESIS: ES POSIBLE QUE LA LESION MUSCULAR ESQUELETICA INDUCIDA POR ETANOL PUEDA ESTAR MEDIDA POR UNA ALTERACION DE LOS PROCESOS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES CELULARES Y DE EXCITACION-CONTRACCION CALCIO-DEPENDIENTES.
OBJETIVOS: DETERMINAR LA CONCENTRACION CITOSOLICA BASAL DE ION CALCIO EN CULTIVOS DE CELULAS MUSCULARES ESQUELETICAS TANTO ANIMALES (RATA) COMO HUMANOS, EN DISTINTAS CIRCUNSTANCIAS: A) EN SITUACION BASAL; B) EN LA EXPOSICION AGUDA A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE ETANOL; C) EN LA EXPOSICION A UNA DOSIS DE ETANOL 100 MM A DIFERENTES INTERVALOS DE TIEMPO; D) EN LA SUPRESION AGUDA DE ETANOL EN CULTIVOS PREVIAMENTE EXPUESTOS A UNA DOSIS DE ETANOL 100 MM Y E) EN LA EXPOSICION CRONICA A UNA DOSIS DE ETANOL 40 MM EN CULTIVOS DE CELULAS ANIMALES.
METODOLOGIA: 1) OBTENCION DE CULTIVOS PRIMARIOS DE CELULAS MUSCULARES ESQUELETICAS, TANTO ANIMALES (RATA ADULTA) COMO HUMANAS (BIOPSIA QUIRURGICA DE VASTO EXTERNO); 2) DETERMINACION DE LA DOSIS TOXICA LIMITE DE EXPOSICION A ETANOL Y 3) DESCRIPCION DE LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS Y DE LA VIABILIDAD CELULAR INDUCIDOS POR LA EXPOSICION AGUDA A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE ETANOL.
PARA LA DETERMINACION DE LA CONCENTRACION CITOSOLICA DEL ION CALCIO SE EMPLEO LA ESPECTROFLUORIMETRIA CON EL INDICADOR FLUORESCENTE FURA-2/AM.
RESULTADOS: 1) LA EXPOSICION AGUDA A ETANOL DE CELULAS MUSCULARES ESQUELETICAS EN CULTIVO PROVOCA UNA DISMINUCION SIGNIFICATIVA DE LA CONCENTRACION CITOSOLICA BASAL IONICA DE CALCIO DE FORMA DOSIS-DEPENDIENTE EN EL RANGO DE EXPOSICION A ETANOL 20-200 MM. 2) EL TIEMPO DE EXPOSICION A UNA DOSIS CONSTANTE DE ETANOL 100MM TAMBIEN INFLUENCIA EN LA CONCENTRACION CITOSOLICA DE CALCIO. 3) LA SUPRESION BRUSCA DEL ETANOL DEL MEDIO PROVOCA UN PICO TRANSITORIO DE ELEVACION EN LA CONCENTRACION CITOSOLICA DE CALCIO. 4) LA CONCENTRACION CITOSOLICA DE CALCIO EN LAS CELULAS DE RATA EN CULTIVO EXPUESTAS A ETANOL 40 MM DURANTE 15 DIAS ES SIMILAR A LA DE UN GRUPO CONTROL NO EXPUESTO A
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