Regulacion transcripcional del gen de la proteina desacopladora (ucp) de tejido adiposo marron. Analisis de la region 5¿proximal
- Autores: Pilar Yubero Arruga
- Directores de la Tesis: Francesc Villarroya Gombau (dir. tes.), Marta Giralt i Oms (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 1996
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Antonio Zorzano Olarte (presid.), Anna María Gómez Foix (secret.), Carlos Ciudad Gómez (voc.), Lluís Montoliu i José (voc.), Anna Messeguer Navarro (voc.)
- Materias:
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- Resumen
1.- Hemos establecido un sistema homologo para el estudio de la actividad transcripcional del gen ucp. Consiste en la transfeccion transitoria de adipocitos marrones diferenciados en cultivo, a partir de celulas precursoras obtenidas de depositos de tejido adiposo marron de raton.
2.- El estudio de la actividad de la construccion (-4551)UCP-CAT, que contiene 4,5 kb de la region 5¿del gen ucp dirigiendo el gen reporter CAT, indica una expresion preferencial en los adipocitos marrones respecto a otros tipos celulares heterologos como HepG2 y CHO. Dicha expresión preferencial se mantiene en la construccion (-896) UCP-CAT, dirigida por la region proximal entre -896/+92.
3.- Hemos establecido un mapa de los lugares deunión a proteinas nucleares en la region proximal del gen ucp mediante analisis "footprint" con DNAsal.
Se han identificado dos lugares: lugar L (-402/-361) y lugar B(-512/-487) con union diferencial a proteinas nucleares de tejido adiposo marron respecto higado.
4.- Los factores de transcripcion C/EBPa y B son activadores de la transcripcion del gen ucp. Dicha acción es mediada principalmente por dos lugares de la region proximal del gen que unen dichas proteinas (-457/-440 y -335/-318) y que son capaces de conferir respuesta a C/EBP a promotores heterólogos.
5.-La expresion de (-4551) UCP-CAT se activa por noradrenalina, AMPc y sobre-expresion de la subunidad catalitica de la proteina kinasa A. Dicho efecto es independiente de los elementos de regulacion tejido-especifica y requiere principalmente la region proximal -157/-54 del gen ucp.
6.-Dicha region contiene un elemento (-139/-122) capaz de unir CREB y proteinas relacionadas con CREB presentes en nucleo de tejido adiposo marron. C-Jun esuna de las proteinas nucleares de tejido adiposo marron que unen icho lugar.
7.- c-Jun actua como represor de la expresion basal y del estimulo por proteina Kinasa a de (-4551) UCP-CAT. Dicho efecto requiere la region proxima
