Regulación de la infección por vih-1 mediante el control de la formación del poro de fusión, por alteración del tráfico de membrana y la reorganización del córtex de actina

• Autores: Laura García Expósito
• Directores de la Tesis: Agustin Valenzuela Fernandez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de La Laguna ( España ) en 2012
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Manuel Siverio Expósito (presid.), José David Machado Ponce (secret.), Maria Jesus Dominguez Luis (voc.), Cristina Risco Ortiz (voc.), Pedro Lorenzo Majano Rodríguez (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
      • Cultivo celular
    • Biología molecular
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• Resumen

  • Durante el desarrollo de esta Tesis Doctoral, hemos demostrado que la alteración de la dinámica de la membrana asociada a PIP2 y coordinada por la GTPasa Arf6, ya sea mediante la interferencia específica de la proteína Arf6 endógena o mediante la sobreexpresión de mutantes activos o inactivos del ciclo GTPasa de Arf6, unidos a GTP o GDP respectivamente, bloquea los primeros estadios de la infección de linfocitos T CD4+ por el VIH-1. Observamos que la sobreexpresión de los mutantes Arf6-Q67L y Arf6-T44N inducen la acumulación de estructuras asociadas a PIP2 en la membrana plasmática de células permisivas, como se visualizó mediante la utilización de una sonda de detección de PIP2, PH-ECFP. Este hecho es indicativo de la modificación del tráfico de membrana asociado a vesículas de PIP2 desde y hacia la superficie celular. Asimismo, la expresión de los mutantes Arf6-Q67L, Arf6-T44N, Arf6-T27N y Arf6-N48I/Q67L en células permisivas inhibe las primeras etapas de la infección viral, que indica que el ciclo GTPasa Arf6-GTP/GDP regula la fusión, entrada e infección eficiente del VIH-1.

    Por otro lado, hemos demostrado que la modificación del citoesqueleto de actina cortical por sobreexpresión de la proteína de unión y corte de F-actina gelsolina, afecta negativamente al agrupamiento de los receptores CD4-CXCR4 o CD4-CCR5 de manera dependiente de actina e inducido por la envuelta gp120 del VIH-1. Igualmente, la sobreexpresión de una construcción funcional de gelsolina, reduce el contenido de F-actina celular cortical disminuyendo la migración de células T en respuesta a un gradiente quimiotáctico mediado por la quimiocina SDF-1alfa, sin afectar a la endocitosis de CXCR4 inducido por ligando.