Identificacion y caracterización de polipeptidos similares a esterasas y fibronectinas como marcadores de la diferenciación sexual del tejido gonadal en moluscos bivalvos marinos

• Autores: María Paz Fernández-España
• Directores de la Tesis: Alexander T. Mikhailov (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidade da Coruña ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Número de páginas: 217
• Tribunal Calificador de la Tesis: Josefina Méndez (presid.), María de la Paz García Martínez (secret.), Lucas Sánchez Rodríguez (voc.), Juan Arechaga Martinez (voc.), Vicente Goyanes Villaescusa (voc.)
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• Resumen
  • español

    En bivalvos marinos la diferenciación sexual de la gónada podría reflejarse en una expresión proteica sexo-dependiente. Elegimos como modelo el bivalvo hermafrodita, Pecten maximus, que presenta un ovotestis en cuyas diferentes partes, masculina y femenina, se realiza de modo simultáneo espermatogénesis u oogénesis, respectivamente. El análisis electroforético de los patrones proteicos de la parte masculina y femenina de la gónada nos permitió detectar y caracterizar parcialmente dos tipos de polipéptidos cuya expresión está asociada con la espermatogénesis u ovogénesis. El polipéptido específico para el tejido testicular es similar a esterasas, y se denominó "Esterase-like polypeptide" (ELP). ELP representa hasta un 8% del total de proteínas solubles del tejido testicular, y no se detecta en el tejido ovárico. ELP es un polipéptido no glicosilado, de peso molecular aparente 39 kDa y punto isoeléctrico 6.1. Mediante técnicas inmunoquímicas se identificó este polipéptido como una proteína similar a las esterasas del tracto reproductivo masculino de M.galloprovincialis (MAP) y D.virilis (esterasa S.). En el tejido testicular de P.maximus se detectó ELP: en la membrana, esperma y fluido luminal de los folículos espermáticos; en la pared de los gonoductos colectores y en el tejido conectivo inter-folicular. Entre los polipéptidos "ovario-predominantes" del ovotestis de P.maximus, detectamos polipéptidos con propiedades similares a la fibronectina de mamíferos, a los que denominamos "Fibronectin-like polypeptides" (FLPs). Los FLPs se detectan a niveles más altos en el tejido ovárico en comparación con el testicular. En el tejido gonadal de otras especies de moluscos bivalvos (gonocócicas y hermafroditas) se han detectado polipéptidos similares a los ELPs y FLPs de P. maximus demostrando que los polipeptidos correspondientes pueden servir como posibles marcadores del dimorfismo sexual del tejido gonadal de bivalvos marinos.

  • English

    The mechanism of sexualization of the tubular gonad in seawater bivalves is unknown, and no information regarding the genes involved in this process is yet available, except for the identification of esterase (Est)-like "male-associated polypeptide" in the male gonad of Mytilus galloprovincialis. Our present work reveals distinct protein profiles specific for the testicular or ovarian portion of the ovotestis of Pecten maximus. Two proteins exhibiting testis- or ovary-dependent enrichment in the ovotestis have been identified and partially characterized as Est-like and fibronectin (Fn)-like polypeptides, respectively. Immunofluorescence has demonstrated a close association between the localization of these polypeptides and the gonad tubule network and interstitial stroma of the ovotestis of P. maximus. We also present evidence of Est-like and Fn-like protein enrichment, respectively, in testicular and ovarian tissue in hermaphroditic, sex-reversal, and gonochoric species of seawater bivalves. Together, the results (1) strongly suggest that sex-cell-biased expression of Est-like and Fn-like polypeptides in gonad tissue is a widespread phenomenon among bivalve mollusks, despite the high diversification of their sexual patterns, (2) confirm and expand our previous demonstration of sex-biased protein expression in M. galloprovincialis, and (3) indicate a direct link between germ cell differentiation and sexual specialization of the bivalve somatic gonad.