Resumen de Produccion y caracterizacion de anticuerpos especificos para los receptores dopaminergicos. Distribucion en la neocorteza de rata
La dopamina es una catecolamina que actúa como neurotransmisor en el sistema nervioso central en funciones tan importantes como el control motor, la estabilidad emocional y el aprendizaje. En este trabajo hemos determinado la distribución y expresión de los receptores de la dopamina en la neocorteza de rata. Como primer objetivo produjimos anticuerpos policlonales específicos para cada uno de los cinco subtipos de receptores dopaminérgicos utilizando péptidos sintéticos derivados del tercer segmento intracelular de los receptores dopaminérgicos tipo-D2, y del extremo C-terminal de los receptores tipo-D1. En inmunoblots de corteza cerebral de rata el anticuerpo anti-D1 reconoce una banda proteica de 45 kDa, anti-D5 una banda de 47 kDa, anti-D2 dos bandas, una de 49 kDa y otra de 93 kDa, anti-D3 una banda de 49 kDa y anti-D4 una banda de 41 kDa. Estos tamaños moleculares proteicos coinciden con el tamaño de los distintos subtipos de receptores dopaminérgicos y que se deducen a partir de sus correspondientes secuencias de cDNA. Además, estos anticuerpos fueron capaces de inmunoprecipitan los receptores de dopamina nativos y ensamblados en las membranas celulares de corteza cerebral de rata.
Los receptores dopaminérgicos de la familia tipo-D1 se expresan homogéneamente en todas las áreas corticales de la neocorteza de rata. Dentro de la familia tipo-D1 pudimos observar una expresión más acusada de los receptores D5 que de los receptores D1. Los receptores D5 son expresados por neuronas neocorticales piramidales y por interneuronas. Los estudios de doble marcaje demuestran que una subpoblación de estas interneuronas dopaminoceptivas son de naturaleza inhibidora GABAérgica, lo que proporcina una evidencia directa del papel regulador de estos receptores en la neurotransmisión GABAérgica. En el caso de los receptores D1 no se pudo determinar la morfología de las posibles neuronas neocorticales que expresan estos re
