Estudios in vitro de la liberación de secreción el órgano subcomisural. Papel del calcio intracelular

• Autores: Francisco Javier Bermúdez Silva
• Directores de la Tesis: Pedro Fernández-Llebrez y del Rey (dir. tes.), José Manuel Fernández-Fígares Pérez (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Málaga ( España ) en 2002
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Becerra Ratia (presid.), Manuel Cifuentes Rueda (secret.), Ángel Nadal Navajas (voc.), León María del Brio de los Ángeles (voc.), Fernando Rodriguez de Fonseca (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
      • Cultivo celular
      • Cultivo de tejidos
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• Resumen

  • El epéndimo es el epitelio que recubre el sistema ventricular. En la mayoría de regiones consta de una monocapa de células cúbicas o cilíndricas multiciliadas. No obstante, en determinadas regiones constituye estructuras especializadas, con células morfológica y funcionalmente diferentes. El órgano subcomisural (OSC) es una de estas estructuras, de naturaleza glandular, secretando al líquido cefalorraquídeo glucoproteínas que plimerizan formando la fibra de Reissner. En la presente tesis se han producido dos anticuerpos monoclonales contra las células ependimarias bovinas de regiones no especializadas, denominadas 3C12 y 5B10. El 3C12 es una Ig G1 que reconoce con mayor afinidad la membrana apical de las células y el 5B10 una Ig M que reconoce con mayor afinidad la membrana basolateral. Ambos epítopos están expuesto extracelularmente y son capaces de ser reconocidos en el tejido bovino cultivado in vitro.

    Los epítopos son específicos de especie y sólo permanecen reconocibles cuando el tejido es fijado con metanol o formalina. En el presente trabajo también se ha puesto a punto un protocolo para obtener un cultivo primario puro de OSC. La actividad secretora del OSC in vitro fue analizada en explantes y cultivos primarios de OSC con ayuda de un ELISA tipo sándwich. Los resultados muestran que los explantes de hasta un mes in vitro y los cultivos primarios recién obtenidos son modelos adecuados para investigar el proceso secretor en estas células, así como para analizar el papel de posibles moléculares reguladoras en la actividad secretora.

    Se hay visto también mediante monitorización de los niveles de calcio intracelular con Indo-1 y Fluo-3 que las células del OSC tienen oscilaciones espontáneas y sincrónicas de calcio intracelular, movilizándose éste desde depósitos internos y no dirigidas por el potencial de membrana. El carbacol, agonista colinérigoco, y el ATP, pero no la serotonina, alteran el patrón