Resumen de Bases moleculares de la diabetes tipo 2: determinantes genéticos de la amilina
La amilina es el principal componente de los depósitos de amiloide detectados en los islotes pancreáticos de pacientes con diabetes mellitus (DM) tipo 2. La presencia de tales depósitos ejerce un papel fundamental en la disfunción y progresiva destrucción de la población celular beta. La hipótesis de trabajo del presente proyecto de tesis doctoral es que mutaciones en la región promotora o en las regiones codificantes del gen podrían conducir a una alteración en la expresión de la amilina o bien en la síntesis del péptido.
OBJETIVOS Investigar la presencia de mutaciones en los exones, 1,2 y 3, así como en la región promotora del gen de la amilina en pacientes con DM tipo 2 y diabetes mellitus gestacional (DMG). Estudio genético y clínico del pedrigrí familiar de pacientes portadores de mutaciones. Estudiar los mecanismos de regulación de la actividad del promotor de la amilina en la línea celular MIN6.
PACIENTES Y MÉTODOS Se estudiaron 392 personas no emparentadas: 186 pacientes con DM tipo 2, 130 controles, 38 mujeres con DMG y 38 gestantes con tolerancia normal a la glucosa. El estudio de mutaciones se analizó por SSCP y confirmación por secunciación. En familiares de primer grado de probandos portadores de mutaciones se practicó estudio genético, así como un test de tolerancia oral a la glucosa (TTOG) para determinar glucosa, insulina y amilina a los 0,30,60,90 y 120 minutos. El estudio de la actividad del promotor de la amilina fue realizado mediante el Sistema Dual-Luciferasa (Promega) en la línea celular MIN6. La actividad lucifersa fue determinada después de 20-24 h de cultivo en preencia de glucosa 5.5 o 22.7 mM, 6-deoxi-D-glucosa 11.2 mM, manoheptulosa 11.2 mM, verapamil 100 uM, diazóxido 0.6 mM, forskolina 10 uM y dexametasona 10 uM.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES Se identificó un polimorfismo intrónico -C79A- asociado a concentraciones plasmáticas más bajas de colesterol total en pacie
