Resumen de Estudio del peptido glucagon-like peptide-1(7-36)amide con anticuerpos poli- y monoclonales
El "glucagon-like peptide-1" (GLP-1) es uno de los productos del procesamiento postraduccional del proglucagón. El péptido existe en diferentes formas moleculares, pero sólo las formas GLP-1(7-37) Y GLP-1(7-36)NH2 tienen actividad biológica, representando esta última un 80% de la totalidad del GLP-1 biológicamente activo.
Esta tesis tuvo por objetivo el desarrollo de un radioinmunoensayo (RIA) muy sensible para las formas amidadas de GLP-1, el uso de este RIA, en combinación con HPLC, para valorar la producción de GLP-1(7-36)NH2 en el hipotálamo, el páncreas y el íleon en comparación con la inmunorreactividad "glucagon-like" (GLI) y el glucagón inmunorreactivo (IRG) en estos tejidos y el bloqueo del péptido endógeno con anticuerpos monoclonales.
La inmunización de conejos con un conjugado de GLP-1(7-36)NH2 con albúmina bovina, obtenido mediante reacción con glutarldehido, permitió obtener un antisuero (CR14C) de título elevado, alta afinidad y específico para el extremo C-terminal amidado del péptido. El RIA desarrollado con CR14C era muy sensible y pudo ser utilizado para determinaciones de GLP-1 amidado en extractos de tejido y muestras pequeñas de plasma de rata.
La producción de GLP-1(7-36)NH2 resultó muy eficaz en el hipotálamo, lo cual indica el posible papel de esta forma molecular como neuropéptido.
En el páncreas, el GLP-1(7-36)NH2 estuvo presente en cantidades muy pequeñas, lo cual argumenta en contra de un papel para el GLP-1(7-36)NH2 producido en el páncreas en la secrección de insulina. En el ileon, la producción de GLP-1(7-36)NH2 resultó muy variable, y fue menos eficaz que lo que se desprende de trabajos anteriores. En uno de los animales, se detectó también GLP-1(1-36)NH2 en cantidades apreciables.
El bloqueo de GLP-1(7-36)NH2 en ratas Wistar conscientes y en ayunas, por la administración intraperitoneal de antícuerpos monoclonales contra dos epitopos diferentes de
