Inmunologia de la dirofilariosis cardiopulmonar felina: marcadores de diagnostico temprano
- Autores: Guadalupe Prieto Maza
- Directores de la Tesis: Fernando Simón Martín (dir. tes.), Claudio Genchi (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Salamanca ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco A. Rojo Vázquez (presid.), Antonio Muro Álvarez (secret.), Ignacio Navarrete López-Cózar (voc.), José Antonio de la Fuente Freire (voc.), Claudio Bandi (voc.)
- Materias:
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- Resumen
La dirofilariosis felina tiene algunas características que hacen difícil la detección de D. Immitis en los gatos. Por otra parte, no existen datos sobre la respuesta de anticuerpos que estos desarrolla contra el parásito.
La parte experimental de la Memoria se ha divido en 6 estudios:
1. Inicialmente se pusieron a punto métodos de ELISA con antígenos somático(SA) y excretor/secretor E(S) de vermes adultos y somático de L3(SL3). Analizando sueros de gatos infectados experimentalmente se detectaron niveles moderados de anticuerpos IgG contra el SL3 al mes post-infección(m.p.i.), descendiendo inmediatamente a niveles basales. Anticuerpos contra los SA y E/S se detectaron a partir de los 2 m.p.i., siendo máximo el incremento entre los 2 y los 4 m.p.i. Posteriormente, los niveles tienden a estabilizarse. Cuarente y cinco días después de retirados los vermes a través de la yugular, las IgGs cayeron por debajo de los límites de positividad establecidos previamente, en un gato infectado naturalmente.
2. Los ELISAs puestos a punto en el estudio anterior, permitieron la detección de anticuerpos a los 2 m.p.i.y fueron capaces de identificar la acción terapeútica de un macrofilaricida a los 3 meses post-tratamiento, en infecciones experimentales.
3. Empleando Western blot se identificaron marcadores moleculares de 19,22,26,30 y 40 kDa en el SA y de 22 y 25 kDa en el E/S. Posteriormente se analizó la reactividad de dichos marcadores en diferentes fases de la infección empleando la misma técnica.
4. Se aislaron fracciones enriquecidas que contenían los marcadores identificados, mediante cromatografía de gel filtración e intercambio aniónico. La fracción F1 contenía las moléculas de 20-28 kDa y la fracción F7 la de 30 kDa. Estas fracciones se aplicaron en ELISA y su capacidad diagnóstica fue evaluada.
La fracción F7 posee una excelente capacidad de diagnóstico precoz (2 m.p.i.), que mejora en casi 1 mes la de otro
