Estudio proteómico en pacientes con metastasis hepáticas de cancer colo-rectal. Identificación de diferentes perfiles proteómicos en relación a los criterios clinico patológicos convencionales de gravedad
- Autores: Adalgiza Reyes Romero
- Directores de la Tesis: Josep Fuster Obregon (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2017
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Ramón Charco (presid.), Ramón Deulofeu Piquet (secret.), Pedro Melgar Lesmes (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Medicina e Investigación Traslacional por la Universidad de Barcelona
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: TDX
- Resumen
El Cáncer colorectal (CCR) es un importante problema de salud pública, siendo el tercer cáncer más comúnmente diagnosticado y la cuarta causa de muerte por cáncer en todo el mundo (1). En los últimos años ha sido comunicado en Europa una incidencia de 446,800 nuevos cánceres, representando aproximadamente el 11% de todos los cánceres en España y el 9% de todos los cánceres en Estados Unidos (2, 3, 4, 5). En Estados Unidos los tres cánceres más frecuentes entre los hombres son el de próstata (43%), el CCR (9%) y el melanoma (7%), y entre las mujeres el cáncer de mama (41%), el de cuerpo uterino (8%) y el CCR (8%) (6) Los países con las mayores reducciones en la mortalidad por CCR se caracterizan por una mejor accesibilidad a la detección, especialmente el cribado endoscópico y la atención especializada. Una gran proporción de las disparidades puede atribuirse al estatus socioeconómico (1,7, 8). Existe una tendencia al crecimiento de la tasa de CCR a nivel mundial, presencia que persistirá probablemente más allá del año 2035 (9). La incidencia y la mortalidad en el CCR se correlacionan con los niveles actuales de desarrollo humano y sus cambios en la adopción de estilos de vida más occidentales (10). Hasta un 77% de los pacientes con CCR desarrollan metástasis hepáticas durante el seguimiento, y son la principal causa de mortalidad en estos pacientes (11). Cerca de un 25% de las metástasis hepáticas por Cáncer colorectal (MHCR) aparecen dentro del primer año del diagnóstico inicial del CCR (metástasis sincrónicas) y después de la resección quirúrgica del CCR primario. El 50%-75% de los pacientes presentan metástasis hepáticas o recidiva de la enfermedad metastásica dentro de los tres años siguientes (11). Menos del 20 % de pacientes con MHCR son quirúrgicamente resecables en el momento del diagnóstico (11, 12, 13, 14). Hay un subconjunto de pacientes con metástasis hepáticas, tanto sincrónicas como metacrónicas, que pueden beneficiarse de la cirugía radical y posiblemente incluso lograr la curación (11). En la actualidad, entre el 25% al 50% de los pacientes con MHCR resecadas quirúrgicamente sobreviven cinco o más años después de la cirugía (11). Hasta el 75% de los pacientes con MHCR resecadas experimentarán recidiva sólo a nivel hepático (11). Clásicamente el pronóstico de los pacientes con MHCR se ha estimado en base a factores e índices pronósticos clínicos como los Criterios de Fong y Norldlinger (15, 16). Sin embargo, actualmente estas puntuaciones pronosticas presentan limitaciones y se consideran subóptimas a la hora de evaluar cuál sería el tratamiento ideal para cada paciente con MHCR según las características de su caso (17, 18). La resección hepática es el único tratamiento que ofrece la posibilidad de curación en pacientes con CCR y metástasis hepáticas (19, 20). De acuerdo con la evidencia actual, los siguientes puntos son considerados fundamentales para ser tenidos enuenta en el momento de la selección del tratamiento ideal para cada caso de MHCR (1) El objetivo principal es lograr la curación o una larga supervivencia libre de enfermedad después de la resección.
(2) La evaluación de la resecabilidad se debe realizar con estudios de imágenes de alta calidad.
(3) El uso de esquemas de quimioterapia de doble o triple regímenes con combinaciones óptimas potenciando su eficacia con la integración de tratamientos actuales como las drogas citotóxicas y anti-angiogénicas. Para la adecuada selección de un tratamiento ideal es esencial el hallazgo de biomarcadores que guíen a una más exacta selección de la terapia ideal para cada caso específico.
(4) Es importante hacer uso de Criterios pronósticos de evaluación de respuesta en tumores sólidos posterior a la quimioterapia de primera línea. De la misma manera hacer uso de criterios para evaluación de los cambios morfológicos relacionados con la respuesta al tratamiento con agentes antiangiogénicos y agentes que intervienen en el crecimiento celular tumoral.
(5) La duración de la quimioterapia debe ser tan corta como sea posible (teniendo en cuenta la potencial hepatotoxicidad por quimioterapia en el hígado sano remanente). La resección quirúrgica óptima (R0) (con márgenes de resección libre de tumor) debe ser realizada tan pronto como sea técnicamente posible evitando así la progresión del tumor. Los resultados de supervivencia y curación dependerán de lo oportuno, adecuado y eficaces que sean el tratamiento oncológico y quirúrgico.
(6) Debido a la heterogeneidad en el comportamiento de las MHCR, en todos los casos es fundamental establecer un tratamiento multidisciplinario con expertos para mejorar los resultados clínicos y la supervivencia en los pacientes.
(7) El número de metástasis o edad del paciente no debe ser una contraindicación absoluta para la cirugía combinada con quimioterapia (5, 20, 21).
as MHCR son una enfermedad de comportamiento heterogéneo como consecuencia de las diferencias a nivel molecular del tejido tumoral primario y de la metástasis. Los mecanismos que subyacen en este proceso son, en gran parte, aún desconocidos. Estudios recientes han mostrado diferencias en la arquitectura molecular de la lesión metastásica en comparación con el tumor primario, sin embargo, no se ha descrito el análisis sistémico de las alteraciones dentro de la red de señalización de las proteínas activadas en el tejido de las MHCR. Por tanto, sería útil encontrar factores característicos específicos del tejido metastásico hepático del CCR que puedan predecir con mayor precisión la supervivencia y recidiva neoplásica tras la resección de las MHCR (19, 21). En los últimos años la proteómica ha jugado un papel importante en la identificación de biomarcadores tumorales asociados a muchas patologías. Estos biomarcadores orientan acerca del pronóstico de la enfermedad en cada caso específico, informan hacia el tratamiento ideal para cada paciente y al entendimiento de la fisiopatología desde el origen de la enfermedad (22, 23). 1.2. HIPOTESIS: 1) Existe un perfil proteómico específico en el tejido tumoral de los pacientes con MHCR. 2) Dicho perfil proteómico es capaz de predecir el comportamiento clínico de la enfermedad. Para contestar a esta hipótesis nos hemos marcado los siguientes objetivos: 1.3. OBJETIVO PRINCIPAL: Identificar perfiles proteómicos específicos que puedan ser predictivos de un determinado comportamiento clínico de la enfermedad en pacientes con MHCR. 1a.- Establecer una comparación entre los perfiles proteómicos de casos sanos y casos de enfermos con MHCR 2b.- Encontrar una correlación entre la expresión de un panel de proteínas y la agresividad del tumor de acuerdo con los criterios pronósticos de Fong. 1.4. OBJETIVO SECUNDARIO: Desarrollar marcadores predictivos / pronósticos de metástasis hepáticas para la recidiva después de la resección hepática; no sólo guiados por los parámetros clínicos, sino también por marcadores moleculares implicados en el proceso de la metástasis hepática. 1.5. METODOLOGIA EMPLEADA: Se incluyen en el estudio un grupo control formado por 10 pacientes sanos y un grupo de 20 pacientes con MHCR tratadas quirúrgicamente con intención curativa y con un comportamiento clínico de la enfermedad conocido. En el grupo control se utiliza tejido hepático sano y en el grupo de MHCR se utiliza tejido tumoral hepático, ambos criopreservados. Se realiza proceso de homogenización del tejido para extracción de proteínas. Estos extractos resultantes se fraccionan por cromatografía de intercambio iónico y se analizan por SELDI- TOF/MS. 1.6. RESULTADOS ESPERADOS: Se espera encontrar perfiles proteómicos específicos que diferencien a los sujetos sanos de pacientes con MHCR y dentro de estos pacientes los de buen o mal pronóstico. 1.7. RESULTADOS OBTENIDOS: Han sido detectadas la expresión de 21 proteínas que mostraron diferencias entre los grupos MHCR graves y leves con valores de p significativos. Se identificó un pico de proteína localizado en m/z con 7373 D. (Dalton) que mostró una clara diferencia entre el grupo MHCR y el grupo control (P < 0,0001). Se generó un árbol de clasificación de 4 nodos que fue capaz de distinguir el grupo control, los pacientes con pronóstico leve y pronóstico grave por la combinación de los picos situados a m/z 2970, 2871, 7929 Dalton, obteniendo una curva ROC de 0,994, 0,947 y 0,952 respectivamente. La sensibilidad del algoritmo fue del 100 % y la especificidad fue del 90 %. El árbol de clasificación se obtuvo combinando 2 picos de proteínas diferentes. La primera proteína a considerar se la encuentra en 2970 m / z (P < 0,051) útil para separar a los pacientes leves de los graves. 1.8. CONCLUSIONES: Para obtener los objetivos planteados en esta tesis se han estudiado un total de 10 tejidos hepáticos sanos y 105 tejidos de MHCR, 20 en el estudio piloto y 85 en el estudio para validación. En este grupo de casos estudiados se demostró que existe un perfil proteómico específico en el tejido hepático tumoral de los pacientes con MHCR. Este perfil proteómico si es capaz de predecir el comportamiento clínico de estos pacientes, por lo tanto, también puede orientar hacia el mejor tratamiento en cada uno de los casos con MHCR. El análisis de los perfiles proteómicos en tejido hepático por el sistema SELDI-TOF/MS, es una herramienta útil para la identificación de nuevos biomarcadores en pacientes con MHCR
