Secuenciación masiva (NGS): Desarrollo, validación y aplicabilidad en el diagnóstico genético preimplantacional (DGP)

• Autores: Alvaro Gómez Duro
• Directores de la Tesis: Esther Fernández García (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2019
• Idioma: español
• Número de páginas: 153
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biología por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Ciencias médicas
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • El Test Genético Preimplantacional (TGP) es el estudio de la información genética de un embrión obtenido mediante técnicas de reproducción asistida, fecundación in vitro con inyección intracitoplasmática y biopsia embrionaria, para seleccionar aquellos embriones cromosómicamente normales o libres de desórdenes genéticos heredados antes de la transferencia al útero materno. Está englobado dentro de la medicina preventiva y es un método de diagnóstico que surge gracias a los avances en las técnicas de reproducción asistida como la biopsia embrionaria en estadio temprano de división (blastómero) o en estadio de blastocisto (trofoectodermo). Sobre esas muestras se pueden aplicar técnicas de análisis cromosómico y molecular para poner de manifiesto posibles alteraciones genéticas y cromosómicas en el embrión y con anterioridad a su posible implantación.

    El objeto fundamental de esta tesis doctoral ha sido validar un protocolo de Secuenciación Masiva (NGS) aplicado al TGP de “screening” de aneuploidías (TGP-A) y alteraciones cromosómicas estructurales (TGP-SR) para el análisis de blastómeros y trofoectodermo.

    Además, se ha desarrollo de un protocolo de análisis estandarizado mediante Reacción en Cadena de la Polimerasa para TGP para su aplicación a distintas enfermedades monogénicas (TGP-M) y para los casos de análisis de enfermedad monogénica y complemento cromosómico (COMB-TGP).

    Los resultados obtenidos confirman que la secuenciación masiva es una técnica robusta, de alto rendimiento y lista para su aplicación clínica en el campo de la genética reproductiva.

    Permite detectar con altísima fiabilidad tanto aneuploidías, desequilibrios cromosómicos como mosaicismo. El protocolo desarrollado para el TGP-M permite identificar en un embrión cualquier enfermedad monogénica cuyo gen esté identificado y además analizar su complemento cromosómico.