Caracterización y regulación de la fosfoenolpiruvato carboxilasa quinasa de hojas y semillas
- Autores: Rosario Álvarez Morales
- Directores de la Tesis: Cristina Echevarría Ruiz de Vargas (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Sevilla ( España ) en 2000
- Idioma: español
- ISBN: 9788469297247
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Gil Martínez (presid.), Francisco Miguel Cánovas Ramos (secret.), Juan Sanchez Garcia (voc.), M. Carmen Martínez-García (voc.), Jean Vidal (voc.)
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- Tesis en acceso abierto en: Idus
- Resumen
La fosfoenolpiruvato carboxilasa (PEPC;EC 4.1.1.31) es una enzima citosólica de muy amplia distribución. Cataliza la B-carboxilación del fosfoenolpiruvato (PEP) en presencia de HCO3y Mg2+ rindiendo oxaloacetato(OAA) y Pi. Esta enzima ha sido muy estudiada en plantas C4 y CAM, en las que juega un papel esencial en el metabolismo fotosintético del carbono. La PEPC está sometida la regulación por fosforilación reversible en un residuo de serina localizado en el extremo N-terminal de la proteína. La fosforilación in vitro de la PEPC induce el cambio en las propiedades cinéticas y de regulación de la enzima, aumentando su velocidad catalítica y afinidad por la glucosa-6-P, y disminuyendo la sensibilidad respecto a su efector negativo, el L-malato. Las enzimas responsables de la fosforilación son las proteínas quinasas. Su identificación, caracterización y la determinación de su modo de activación representa en gran parte el estudio de la señalización en plantas. En este trabajo de tesis hemos caracterizado y purificado la(s)PEPC-quinasa(s) de extractos crudos de hojas de sorgo iluminadas o mantenidas en oscuridad, así como en fracciones purificadas, encontrándose actividad quinasa Ca2+- dependiente y Ca2+-independiente. Resultados obtenidos en este trabajo ponen en evidencia por primera vez que la región C-terminal de la PEPC está implicada en el reconocimiento y especificidad de la PEPC-quinasa y aporten una prueba concluyente a favor de que la quinasa fisiológica que fosforila a la PEPC sea la Ca2+ -independiente. Además nuestros resultados permiten afirmar que existen in vivo fenómenos de proteolisis implicados en la regulación de la fosforilación de la PEPC. Por otra parte, hemos estudiado la PEPC y PEPC-quinasa de semillas. En semillas de cebada se muestra por primera que el H-7, un inhibidor de quinasas de tipo PKA y PKC, es capaz de actuar in vivo inhibiendo la fosforilación de la PEPC.
