Resumen de Desenvolupament d'una formulació i forma farmacèutica estable per vectors adenovirals
Los vectores adenovirales están lejos de ser establecido en la práctica habitual en terapia génica debido a la dificultad de preservar su actividad en unas condiciones óptimas para el transporte y la administración. Actualmente, la estabilización de los adenovirus a largo plazo requiere de la presencia de glicerol a una temperatura de -80ºC. Esta temperatura de ultracongelación genera importantes inconvenientes a nivel de almacenaje, transporte y práctica clínica. Y por otro lado, la presencia de glicerol requiere de una extensa dilución antes de su administración para reducir los efectos tóxicos. De este modo, la mejora de la termoestabilidad ha sido reconocida como una diana imprescindible para mejorar el impacto de los vectores virales en la Salud.
El objetivo de este estudio fue identificar una combinación de excipientes que permitiera conservar el Adenovirus tipo 5 a temperaturas superiores manteniendo la actividad a niveles aceptables. Al mismo tiempo, se diseñó un ciclo de liofilización que limitara las pérdidas de funcionalidad con una comportamiento más controlable y reproducible.
Este objetivo requería de una aproximación global que empezara analizando los factores que intervienen en la estabilidad viral antes y después de la liofilización, y los mecanismos responsables de la inactivación durante el almacenaje. Entre los factores que afectan a la estabilidad destaca la concentración vírica, el pH, la agregación y la humedad. Es crucial controlar los últimos parámetros durante el proceso mediante la técnica de Dispersión Dinámica de la Luz (Dynamic Light Scattering, DLS) y la valoración coulombimétrica de Karl Fischer, así como verificar el título físico y funcional en las diferentes etapas del proceso para garantizar un buen diseño.
Se desarrolló un set de formulaciones para evaluar la eficacia protectora en solución a 5ºC y durante la liofilización y almacenaje. Se ha identificado una formulación estables como mínimo 8 h a temperatura ambiente, lo que la hace adecuada para el escalado industrial. El ciclo de liofilización diseñado y la formulación seleccionada evitan las pérdidas de actividad durante la liofilización al tamaño de lote establecido. la actividad se mantiene hasta le punto de análisis de 3 meses a -20ºC y 5ºC. La formulación candidata está siendo sometida a un estudio de estabilidad de 2 años a -20ºC y 5ºC.
