La 1,5-difosfato de ribulosa carboxilasa/oxigenasa de hojas de naranjo. Caracterizacion y estudio de su inactivacion y degradacion proteolitica

• Autores: Dolores Peñarrubia Blasco
• Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 1989
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Luis Franco Vera (presid.), Vicente Rubio Zamora (secret.), Jose García Martínez (voc.), Juan Carbonell Gisbert (voc.), José María Vega Piqueres (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
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• Resumen

  • SE HA PUESTO A PUNTO UN METODO DE EXTRACCION Y PURIFICACION DE LA RUBISCO A PARTIR DE HOJAS DE NARANJO QUE CONSTA DE LOS SIGUIENTES PASOS: EXTRACCION DE PROTEINAS SOLUBLES DE LA HOJA, PRECIPITACION FRACCIONADA CON SULFATO AMONICO, CENTRIFUGACION EN GRADIENTE DE SACAROSA Y CROMATOGRAFIA EN DEAE-CELULOSA. LA ACTIVIDAD ESPECIFICA DISMINUYE A LO LARGO DEL PROCESO COMO CONSECUENCIA DE LA INACTIVACION DEL ENZIMA. LA PUREZA FINAL DE LA RUBISCO ES DE 98% Y EL RENDIMIENTO DEL 12%.

    SE HAN CALCULADO LAS MASAS MOLECULARES DEL HOLOENZIMA (520 KDA) Y DE LAS SUBUNIDADES (50 Y 15.5 KDA) Y SE HAN PUESTO APUNTO DOS METODOS COMPLEMENTARIOS DE SEPARACION DE LAS MISMAS REALIZANDOSE EL ANALISIS DE LA COMPOSICION DE AMINOACIDOS.

    LA ACTIVIDAD DE LA RUBISCO SE PIERDE RAPIDAMENTE CON EL TIEMPO DEBIDO A LA EXISTENCIA DE ALGUN TIPO DE INESTABILIDAD ESTRUCTURAL DEL ENZIMA QUE SE PONE DE MANIFIESTO AL SOMETER LAS DISOLUCIONES DE LA RUBISCO A MANIPULACIONES MECANICAS QUE IMPLIQUEN CIZALLA HIDRODINAMICA DEL MEDIO. ALGUNAS PROTEINAS (HEMOGLOBINA, SEROALBUMINA Y ALDOLASA) PROTEGEN A LA RUBISCO DE LA INACTIVACION PROBABLEMENTE DEBIDO A LA INHIBICION DE LA ADSORCION DE LA RUBISCO A LAS PAREDES DEL RECIPIENTE. LA PROTEOLISIS ES UN COMPONENTE MINORITARIO EN EL PROCESO DE LA INACTIVACION EN EL QUE JUEGAN UN IMPORTANTE PAPEL EL ESTADO DE OXIDACION DE ALGUNOS RESIDUOS DE CISTEINA.

    LA DIGESTIBILIDAD PROTEOLITICA DEL ENZIMA DE CITRICOS AUMENTO TRAS EL TRATAMIENTO CON AGENTES OXIDANTES O CON REACTIVOS QUE MODIFICAN LAS CISTEINAS.

    ELLO SUGIERE UN SISTEMA DE REGULACION DE LA DEGRADACION DE LA RUBISCO QUE PODRIA OPERAR IN VIVO GOBERNADO POR EL POTENCIAL REDOX DEL ESTROMA.