Diferenciacion bioquimica de razas del virus de la tristeza de los citricos (ctv) y aplicacion a la proteccion cruzada

• Autores: María del Remedio Albiach Martí
• Directores de la Tesis: Pedro Moreno Gómez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 1995
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Vicente Conejero Tomás (presid.), José Luis Rodríguez García (secret.), Fernando García Arenal (voc.), Mariano J. Cambra Álvarez (voc.), Ricardo Flores Pedauye (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
  • Ciencias de la vida
    • Virología
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• Resumen

  • PARA LA IDENTIFICACION DE RAZAS DEL VIRUS DE LA TRISTEZA DE LOS CITRICOS (CTV), SE ENSAYARON VARIAS TECNICAS. EL ANALISIS DE MAPAS DE PEPTIDOS DE LA PROTEINA CAPSIDICA DE CTV PERMITIO IDENTIFICAR LOS 5 AISLADOS ESTUDIADOS, QUE NO HABIAN PODIDO SER DISTINGUIDOS MEDIANTE METODOS BIOLOGICOS O ELISA. EN ESTE APARTADO SE PUSIERON A PUNTO UN METODO RAPIDO DE OBTENCION DE LA PROTEINA CAPSIDICA DE CTV Y OTRO DE REUTILIZACION SUCESIVA DE MEMBRANAS DE PVDF, REVELADAS CON EL SUBSTRATO BCIP-NBT, CON DISTINTOS ANTICUERPOS. EL ANALISIS DE RNAS BICATENARIOS PRODUCIDOS DURANTE LA REPLICACION DEL VIRUS, PERMITIO EVIDENCIAR LA PRESENCIA DE DISTINTAS RAZAS DE CTV EN LOS AISLADOS ESTUDIADOS Y LA POSIBILIDAD DE SEPARARLAS MEDIANTE PROCESOS DE FILTRACION A TRAVES DE HUESPEDES O DE TRANSMISION POR INJERTO O AFIDOS. PARA LA HIBRIDACION MOLECULAR CON SONDAS DE DNA COMPLEMENTARIO (CDNA) DEL GENOMA VIRAL, SE CARACTERIZO UNA GENOTECA OBTENIDA A PARTIR DEL AISLADO VIRULENTO B-2. EL USO DE UN PANEL DE 48 SONDAS DE ESTA GENOTECA Y 9 CLONES DEL GEN QUE CODIFICA LA PROTEINA CAPSIDICA DE CTV, PERMITIO LA DIFERENCIACION DE LA MAYORIA DE LOS 64 AISLADOS DE CTV DE LA COLECCION DEL IVIA Y DE LOS 17 DE LA COLECCION DE BELTSVILLE ESTUDIADOS, Y LA CONFIRMACION DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL APARTADO DE ANALISIS DE DSRNA.

    LA HIBRIDACION MOLECULAR EN LA MODALIDAD DE "NORTHERN-BLOT" SE CONSIGUIO LA DIFERENCIACION ENTRE AISLADOS DE CTV, LA LOCALIZACION DEL GEN DE LA PROTEINA CAPSIDICA EN LAS BANDAS SUBGENOMICAS ENTRE 13.3 Y 2.0 MD (AMBAS INCLUSIVE) Y EVIDENCIO EL POSIBLE ORIGEN 3' COTERMINAL DE LAS MISMAS. MEDIANTE EL USO DE LAS TECNICAS DE ANALISIS DE DSRNA E HIBRIDACION MOLECULAR SE PUDO SEGUIR LA INTERFERENCIA ENTRE RAZAS DE CTV, TANTO EN ARBOLES DE CAMPO COMO EN PLANTAS DE INVERNADERO INOCULADAS SIMULTANEA O SUCESIVAMENTE CON DOS O MAS AISLADOS.