Clonacion y estructura tridimensional de la carbamato quinasa. Cristalizacion d e la carbamilfosfato sintetasa i
- Autores: Alberto Marina Moreno
- Directores de la Tesis: Vicente Rubio Zamora (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 1998
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Santiago Grisolia (presid.), Concepción Abad Mazarío (secret.), Pedro Alzari (voc.), Carlos Gómez-Moreno Calera (voc.), Francesc Xavier Avilés Puigvert (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
El trabajo de tesis describe la purificación de la enzima carmato quinasa producida por Enterococcus faecium, el clonado y secuenciación del gen que codifica para esta proteína en Enterococcus faecium y Enterococcus faecalis, su subclonado en Escherichia coli, la expresión y purificación de dicha enzima producida a partir de estos clones de E. coli, la cristalización de la carbamato quinasa natural o, recombinante, y la determinación de la estructura tridimensional de esta enzima a 2.8 A de resolución utilizando técnicas de difracción de rayos X.
La carbamato quinasa es un dímero, constituido por monómeros de 310 aminoácidos, cuyo elemento estructural principal es una hoja beta abierta de 8 elementos en su mayoría paralelos, rodeada por ambas caras de alfa hélices. En esta hoja beta se observa una gran oquedad, donde se ha localizado un ión sulfato, y que se propone como centro activo de la enzima.
También se describe la purificación y cristalización de la carbamilfosfato sintetasa I de Rana catesbeiana y la caracterización de estos cristales usando técnicas de rayos X.
