Resumen de Metabolismo de farmacos por hepatocitos humanos. Aplicacion al estudio de la toxicidad de antiinflamatorios no esteroideos
La presente Tesis ha estado dirigida a investigar aspectos básicos del metabolismo y hepatotoxicidad de loa AINEs haciendo uso de los modelos celulares hepáticos y, en concreto, a determinar las rutas metabólicas del diclofenac y sus análogos en el hombre y a esclarecer el mecanismo molecular de su toxicidad.
La Tesis incluye el desarrollo de herramientas fundamentales en el estudio in vitro de la toxicidad y metabolismo de fármacos.
La Tesis se compone de 5 capítulos interrelacionados de los que se extraen las siguientes conclusiones, que constituyen el resumen de la Tesis Doctoral.
1.- Los metabolitos identificados en cultivos de hepatocitos de rata fueron 4'-hidroxi-, 5-hidroxi y N,5-dihidroxidiclofenac, un metabolito secundario del diclofenac descrito por primera vez en esta Tesis. En hepatocitos humanos se identificaron además 3'-hidroxi y 4', 5-dihidroxidiclofenac.
2.- El CYP2C9 es responsable de la formación de 4'-hidroxi, 3'-hidroxi y 4', 5-hidroxidiclofenac.
En la formación de 5-hidroxidiclofenac están implicados, de mayor a menor relevancia los CYP2C8, CYP2C19, CYP2C18 y CYP2B6.
3.- Hemos podido establecer que la célula el N, 5-dihidroxidiclofenac se genera a partir de 5-hidroxidiclofenac. A su vez, en N,5-dihidroxidiclofenac puede redurirse a su precursor en presencia de NADPH y mocrotosomas hepáticos.
4.- En hepatocitos humanos el aceclofenac es metabolizado casi exclusivamente a 4'-hidroxiaceclofenac; en hepatocitos de rata es hidrolizado por una esterasa hepática a diclofenac, el cual es posteriormente metabolizado a 4'-hidroxi y 5-hidrodiclofenac.
5.- El diclofenac y sus metabolitos son capaces de inhibir la síntesis mitocondrial de ATP, y ello, junto con la depleción de NADPH debida al ciclo fútil 5-OHDic/N,5-diOHDic, posiblemente constituyen la base de la hepatotoxicidad del diclofenac.
6.- Mediante el empleo de modelos in vitro hemos conseguido reproducir el fenómeno de la
