Eritrocitos dializados como portadores de principios activos. Características y comportamiento "in vivo" . Modificación del destino mediante la unión de transferrina a su superficie
- Autores: M. Teresa Pérez Maroto
- Directores de la Tesis: Pilar Sancho López (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Alcalá ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Luque Cabrera (presid.), Dolores Vallejo Ruíz (secret.), María Dolores Delgado Villar (voc.), María Teresa Muiño Blanco (voc.), Álvaro Sánchez Ferrer (voc.)
- Calificación: Sobresaliente Cum Laude
- Materias:
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- Resumen
Uno de los objetivos prioritarios de la investigación sanitaria actual es la búsqueda de nuevos sistemas de administración de fármacos que permitan una liberación controlada y selectiva de los mismos. En esta tesis se han utilizado los eritrocitos como portadores de principios activos, empleando la diálisis hipotónica-isotónica como técnica que permite la incorporación de sustancias mediante la apertura transitoria de poros en la membrana.
En primer lugar se estudiaron diferentes propiedades funcionales y estructurales de los eritrocitos a fin de comprobar si tales propiedades habían sido alteradas durante el proceso de diálisis hipotónica-isotónica. En relación con las propiedades funcionales, se realizaron medidas de actividad piruvato quinasa, enzima relacionada con el metabolismo celular, y de parámetros relacionados con la hemoglobina (hemoglobina corpuscular media, capacidad de la hemoglobina para transportar oxigeno, etc.). Para estudiar las alteraciones estructurales se utilizo la técnica de reparto en sistemas bifásicos acuosos de polietilenglicol y dextrano, que detecta ligeras modificaciones en las propiedades superficiales de membrana.
En segundo lugar se estudio el comportamiento in vivo de los eritrocitos de ratón dializados y separados según la edad celular mediante la técnica de distribución en contracorriente en sistemas bifásicos acuosos(en base a la carga superficial) y mediante a técnica de fraccionamiento en gradientes de densidad con Percoll (en base a la densidad celular). De esta forma se obtienen de eritrocitos portadores de diferente edad para controlar la liberación de las sustancias encapsuladas en función de la vida media de los eritrocitos en circulación.
Finalmente, se modificó la superficie de los eritrocitos dializados con el fin de dirigirlos a órganos diana. Para ello, se une transferrina a la superficie de los eritrocitos dializados, utilizando glutaraldehido como reactivo bifuncional, y se estudia el destino de los eritrocitos-transferrina a diferentes órganos. Los eritrocitos-transferrina, son reconocidos en una mayor proporción por células de medula ósea, con receptores específicos para transferrina. En resumen, los estudio realizados nos permiten seleccionar distintas poblaciones de eritrocitos portadores, con diferente comportamiento in vivo y diferente destino, para su administración en función de las propiedades terapeúticas de las sustancias a encapsular.
