Resumen de Estudi de la malaltia residual minima en el neuroblastoma
El neuroblastoma és el tumor sòlid extracranial més freqüent de la infància, deriva de les cèl·lules de la cresta neural i té una gran heterogeneïtat biològica, que clínicament es tradueix en possibilitats que oscil·len des de la regressió espontània fins a la progressió inexorable malgrat les teràpies multimodals més agressives. Es pretén analitzar i quantificar la malaltia micrometastàsica, a moll d'os, i microcirculant, a sang perifèrica, en pacients pediàtrics afectes de neuroblastoma en estadis avançats, així com determinar-ne l'impacte pronòstic en aquest tumor.Les anàlisis s'efectuen mitjançant tècniques de biologia molecular consistents en expressió del gen Tirosina Hidroxilasa (TH) mitjançant retrotranscripció i reacció en cadena de la polimerasa (RT-PCR) com a marcador de la presència de cèl·lules neuroblàstiques a sang perifèrica i a moll d'os. S'analitzen també tots els tumors i els productes de leucafèresi dels pacients que han de ser sotmesos a un autotransplantament de moll d'os. Utilitzant tècniques semi-quantitatives mitjançant assajos per dilucions límit i densitometria comparativa es detecta expressió il·legítima, és a dir, aquella que deriva de cèl·lules no neoplàsiques, fet freqüent quan s'utilitza com a diana gens constitutius. Per obviar aquest problema i intentant augmentar l'especificitat es va utilitzar una tècnica de PCR "touch-down". Aquesta tècnica, en tumors, va evidenciar la presència de dues variants alternatives no conegudes fins al moment del gen TH, corresponents als splicing alternatius dels exons 8 i 8+9.
Aquests splicing, que poden tenir implicacions en el seguiment de la malaltia residual mínima, podrien convertir el gen en un marcador tumor-específic i podrien ajudar també a diferenciar la malatia derivada de l'expressió de neuroblastes de l'expressió il·legítima. La traducció dels nous tipus d'mRNA dóna lloc a una possible proteïna truncada
