Estudio sobre la modulación alostérica de la afinidad hb-o2 en vertebrados superiores y su repercusión en el transporte de oxígeno

• Autores: M. Teresa Prats Ruiz
• Directores de la Tesis: Miquel Riera i Codina (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Jesús Palomeque Rico (presid.), Marta Cascante Serratosa (secret.), Jacinto Nadal Puigdefábregas (voc.), Lluís Tort Bardolet (voc.), Isidre Casals Ribes (voc.)
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• Resumen

  • Se ha investigado la influencia de los principales efectores alostéricos (Ins-P5, ATP, 2,3-BPG, CO2, H+, Cl- y Tª) sobre la afinidad hemoglobina-oxígeno (Hb-O2) en dos tipos de vertebrados que utilizan modelos alostéricos particulares:

    1,- La codorniz (Coturnix coturnix japonica) como modelo de ave, caracterizada por usar como regulador eritrocitario de la afinidad Hb-O2 un fosfato desligado de las principales vías energética de las células: el Ins-P5.

    2,- La cabra (Capra pyrenaica hispánica), rumiantes y caso singular dentro de los mamíferos ya que sus eritrocitos carecen de fosfatos orgánicos reguladores de la afinidad Hb-O2 y modulan la afinidad por C1- al presentar sus cadenas beta sustituciones de aminoácidos que la hacen menos sensible a los fosfatos.

    Ambos grupos son de interés ya que presentna demandas metabólicos relativamente elevadas y han sido poco estudiados en lo que se refiere a la regulación molecular del transporte de O2 en dos modelos funcionales diferentes, como son las aves y los mamíferos, permite contrastar los aspectos diferenciales de ambos y ampliar la información existente para poder resolver algunas cuestiones pendientes de clarificar en la modulación alostérica de dichos tipos de Hbs.

    Para la realización del presente trabajo se han puesto a punto una serie e técnicas cromatográficas con el objetivo de: aislar, purificar y separar las diferentes Hbs, y aislar y purificar el Ins-P5, para su posterior utilización en los experimentos de modulación alostérica (Prats y Riera, 1994. Anal. Biochem. 221:335-339). Los estudios de afinidad Hb-O2 se han realizado mediante dos metodologías diferentes; método polarográfico (Neville, 1974; Hughes y cols. 1988) y métodos tonométrico (Giardina y Amiconi, 1981), éste último utilizado en una estancia en la universidad de Tor Vergata de Roma con los Dres. S. Condó y B. Giardina.

    También se ha tenido la oportunidad de caracterizar el transporte de oxi