Análisis de la generación de anticuerpos anti-HLA en la terapia con ASC alogénicas en la enfermedad de Crohn fistulizante

• Autores: Cristina Martín Martín
• Directores de la Tesis: Olga de la Rosa Morales (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2019
• Idioma: español
• Número de páginas: 146
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
  • Ciencias médicas
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen
  • español

    La administración de células madre mesenquimales (MSC) en el tratamiento de trastornos inflamatorios, isquémicos e inmunológicos representa una terapia prometedora. El uso de células mesenquimales derivadas de tejido adiposo (ASC), de mayor accesibilidad y rendimiento que otras fuentes, resulta una herramienta atractiva para favorecer entre otras, la formación de células T con un fenotipo regulador y/o el bloqueo de la maduración y función de las células dendríticas, lo que ha arrojado resultados beneficiosos en modelos animales y estudios preclínicos en humanos que confirman la eficacia y el papel inmunomodulador de las ASC. Estos hallazgos han estimulado el uso de terapias basadas en MSC alogénicas, a pesar del importante papel que juegan los antígenos leucocitarios humanos (HLA) en el rechazo de injertos, en donde la sensibilización HLA se ha señalado clásicamente como un factor de riesgo en el trasplante de órgano sólido (TOS), asociándose a peor pronóstico tanto a corto como a largo plazo. Sin embargo, en los desarrollos enfocados al estudio de la seguridad y eficacia terapéutica de las ASC, pocas veces se incluye un estudio que evalúe la respuesta alogénica en el receptor.

    El objetivo general del proyecto es determinar la presencia, generación y efecto de los anticuerpos anti-HLA tras la administración local de ASC alogénicas controlado con placebo en 123 individuos con enfermedad de Crohn que presentan fístulas perianales complejas pertenecientes al ensayo clínico en fase III del producto Cx601 (NCT01541579). Se tomó como punto de partida el conocimiento, desarrollo y técnicas actuales en el campo del TOS y en todos ellos, se midió la presencia de anticuerpos anti-HLA antes y después del tratamiento a doble ciego. De forma complementaria, se demostró la capacidad de reconocimiento in vitro de las ASC por parte de los anticuerpos anti-HLA definidos y la capacidad lítica de los mismos. Además, los resultados se relacionaron con el tipaje HLA de cada paciente y se estudiaron las diferencias antigénicas con el HLA de las ASC utilizadas, tratamiento concomitante a la terapia celular y también con otros parámetros inmunes detectados a nivel sistémico. Como valor añadido al estudio de seguridad y eficacia, se ha determinado la progresión clínica de cada paciente incluido en el ensayo en relación a la presencia de estos anticuerpos, demostrando la eficacia del uso de ASC alogénicas a pesar de la generación de anticuerpos anti-HLA, hecho que es indicativo de una interacción entre el sistema inmune del paciente y el producto celular pero en base a nuestros resultados, no tiene relación directa con la evolución clínica, al menos, en aquellos pacientes sin sensibilización previa contra antígenos HLA. No obstante, el presente trabajo, da constancia de la generación de respuestas secundarias o de memoria en aquellos pacientes con presencia previa de anticuerpos (individuos presensibilizados) que dada la poca representación que han tenido en la cohorte, no permiten concluir de forma significativa la relación de eficacia con el producto celular, por lo tanto, futuros estudios serán necesarios para determinar con éxito el algoritmo a seguir en estos pacientes.

  • English

    Administration of mesenchymal stem cells (MSC) in the treatment of inflammatory, ischemic and immunological disorders represents a promising therapy. The use of mesenchymal cells derived from adipose tissue (ASC), with greater accessibility and performance than other sources, is an attractive tool to favor, among others, the formation of regulatory T cells and / or blocking of maturation and function of dendritic cells, which has shown beneficial results in animal models and preclinical studies in humans that confirm the efficacy and immunomodulatory role of ASC. These findings have stimulated the use of allogeneic MSC-based therapies, despite the important role played by human leukocyte antigens (HLA) in graft rejection, where HLA sensitization has been classically indicated as a risk factor in transplantation of solid organ (TOS), associating to worse prognosis in both short and long term. However, in the clinical trials focused on the study of the safety and therapeutic efficacy of ASC, a study to value the allogeneic response in the receptor is rarely included.

    The general objective of the project is to determine the presence, generation and effect of anti-HLA antibodies after the local administration of allogeneic ASC controlled with placebo in 123 individuals with Crohn's disease who present complex perianal fistulas belonging to the phase III clinical trial of the product Cx601 (NCT01541579). The knowledge, development and current techniques in the field of TOS were taken as starting point and in all of them, the presence of anti-HLA antibodies was measured before and after the double-blind treatment. In a complementary manner, the ability of in vitro recognition of ASC by the defined anti-HLA antibodies and their lytic capacity was demonstrated. In addition, the results were related to the HLA typing of each patient and the antigenic differences with the HLA of the ASC used, concomitant treatment to the cell therapy and also with other immune parameters detected at the systemic level. As an added value to the study of safety and efficacy, the clinical progression of each patient included in the trial has been determined in relation to the presence of these antibodies, demonstrating the efficacy of the use of allogeneic ASCs despite the generation of anti-HLA antibodies, this is indicative of an interaction between the immune system of the patient and the cellular product but based on our results, has no direct relationship with clinical evolution, at least, in those patients without previous sensitization against HLA antigens. However, this work shows the generation of secondary or memory responses in those patients with pre-existing antibodies (presensitized individuals) that, given the poor representation they have had in the cohort, do not allow concluding the relationship between efficacy and the allogeneic product, therefore, future studies will be necessary to determine successfully the algorithm to follow in these patients.