Detección y caracterización de micoplasmas porcinos. Aplicación de la citometría de flujo al estudio de mycoplasma hypopneumoniae

• Autores: Patricia Alexandra Clemente Janeiro de Assunçao
• Directores de la Tesis: José B. Poveda Guerrero (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Las Palmas de Gran Canaria ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Antonio Jesús Fernández Rodríguez (presid.), Fernando Real Valcárcel (secret.), Segundo Píriz Durán (voc.), Jaume F Comas Riu (voc.)
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• Resumen

  • Para la ampliación del conocimiento de la enfermedad, y debido a la escasez de cepas de M. Hyopneumoniae aisladas en el territorio español y con la finalidad de poder continuar con nuestros estudios, en el segundo capítulo, nuestro capital objetivo ha sido la obtención de cepas de campo de M.

    Hyopneumoniae. Para ello hemos trabajado sobre un total de 142 muestras de 54 pulmones con lesiones características de la NEP. La identificación de los aislamientos fue realizada en dos fases. Primero se utilizaron pruebas orientativas, como son las caracteristicas de cultivos y las pruebas bioquímicas y enzimáticas. A continuación, para confirmar los resultados obtenidos se empleó como prueba definitiva la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). El tercer capítulo de esta tesis consistió en la caracterización de las cepas de M. Hyopneumoniae aisladas, por las técnicas de SDS-PAGE e Immunoblot. Para el Immunoblot se utilizó un antisuero policional producido frente a la cepa de referencia de M. Hyopneumoniae (cepa J), un antisuero policional purificado producido uno frente a la proteína de membrana p46 y el otro frente a la adhesina p97. Finalmnete, en el cuarto capítulo, se estudió el crecimiento de M. Hyponeumoniae a través de la técnica de citometría de flujo y se comparó los resultados de esta técnica con otras técnicas tradicionales, las Unidades Cambiadoras de Color50 y la medición del pH.