Métodos inmunoquímicos de análisis de plaguicidas. Desarrollo y comparación de metodologías analíticas

• Autores: Ana Francisca González Díaz
• Directores de la Tesis: Francisco García Sánchez (dir. tes.), Aurora Navas Diaz (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Málaga ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Marcel Blanco Romia (presid.), Catalina Bosch Ojeda (secret.), Victoriano Valpuesta Fernandez (voc.), Fèlix Grases Freixedas (voc.), María Dolores Luque de Castro (voc.)
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• Resumen

  • Los objetivos de la tesis han sido cuantificar la plaguicidas a través del desarrollo de distintas metodologías inmunoquímicas, realizando una comparación de todas ellas.

    Se han desarrollado inmunoensayos de tipo homogéneo y heterogéneo. Se ha cuantificado Triclopyr en muestras de agua de grifo mediante un ensayo homogéneo de polarización con anticuerpo policlonal. Otro inmunoensayo homogéneo desarrollado emplea la espectrofluorimetría de fase y modulación utilizando los tiempos de vida para cuantificar el plaguicida 2,4 D con anticuerpo monoclonal.

    También se han desarrollado ensayos heterogénos de tipo ELISA en el que se produce la separación de la fracción libre y unida. Se ha empleado la peroxidasa de rábano picante que se halla conjugada al anticuerpo secundario que es el reactivo marcador. Se ha aplicado este método para cuantificar 2,4,5 T en zumo de manzana con substrato fluorescente que usa espectrofluorímetro, lector de placa y fibra óptica como sistema de detección.

    El método también se ha aplicado para cuantificar 2,4,5 T y Triclopyr en zumo de manzana, usando substrato quimioluminiscente (lumino1/H2O2/PIP).

    La señal CL se detecta con cámara CCD y posterior análisis de la imagen.

    Se ha diseñado y desarrollado programas de adquisición de imágenes y de procesado de las mismas, específicos para esta aplicación.