Estudio genético de la degradación de hidrocarburos aromáticos por cepas de Pseudomonas SP

• Autores: Elena García-Valdés
• Lectura: En la Universitat de les Illes Balears ( España ) en 1987
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Joan Jofre Torroella (presid.), Juana Pou (secret.), Miguel Regué Queralt (voc.), Eduard Petitpierre Vall (voc.), Guillem Ramon Pérez de Rada (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Genética
      • Ingeniería genética
    • Microbiología
      • Fisiología bacteriana
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• Resumen

  • Se ha puesto a punto un metodo deenriquecimiento y seleccion para la deteccion de cepas bacterianas de bajo peso molecular de entre los aislamientos de origen marino destacan siete cepas de pseudomonals sp que no pertenecen a pseudomonas putida. Se han ensayado y adoptado diversos metodos para la extraccion de adn plasmidico entre ellos el metodo de pornoy white kadoyliu. Se ha estudiado la relacion entre la presencia de plasmido y el fenotipo degradativo. Se ha postulado la localizacion cromosomica de los genes responsables de la degradacion de naptaleno en 3 de las siete cepas estudiadas se ha clonado y expresado en escherichia coli de los genes que codifican los enzimas catecol 2 3-oxigemasa salicilato hidroxilasa y su regulacion en pseudomonas sp anii partiendo de adn total de esta cepa y empleado el vector pbr 322. Se ha localizado con aproximacion la situacion de tales genes en el mapa de restriccion del inserto clonado mediante la obtencion de dos subclones que expresan niveles constitutivos de la catecol 2 3-oxigenasa y niveles inducibles de salicilato hidroxilasa respectivamente. Los genes clonados se expresan en e. Coli bajo el control de sus propios promotores. La expresion en pseudomonas putida con el replicon pkt230 da valores mas elevados. Los resultados obtenidos contradicen las conclusiones de otros autores sobre la difecultad de expresion e induccion en e. Copi.