Resumen de Regulación, purificación y propiedades de la nitrito reductasa de la cianobacteria phormidium laminosum
Jesús María Arizmendi Bastarrika
LA NITRITO REDUCTASA ES UN ENZIMA IMPLICADO EN LA REDUCCION ASIMILATORIA DE NITRATO. EN CIANOBACTERIAS, EL NITRATO ES TRANSPORTADO AL INTERIOR CELULAR POR UN SISTEMA DE TRANSPORTE ACTIVO Y, POSTERIORMENTE, REDUCIDO HASTA AMONIO POR LA ACCION SECUENCIAL DE LA NITRATO REDUCTASA Y LA NITRITO REDUCTASA. EL AMONIO ES DESPUES INCORPORADO A ESQUELETOS CARBONADOS POR MEDIO DE LA VIA GLUTAMINA SINTETASA-GLUTAMATO SINTASA O POR RUTAS ALTERNATIVAS COMO LA GLUTAMATO DESHIDROGENASA. LOS NIVELES DE ACTIVIDAD NITRITO REDUCTASA DE P. LAMINOSUM VARIAN CON LA FUENTE DE NITROGENO DEL MEDIO, SIENDO MAXIMOS EN CELULAS CRECIDAS EN NITRATO E INDETECTABLES EN MEDIOS CON AMONIO. ESTAS VARIACIONES DE ACTIVIDAD SE DEBEN PRINCIPALMENTE A LA REGULACION DE LA SINTESIS O DEGRADACION DEL ENZIMA Y NO A PROCESOS DE ACTIVACION O INACTIVACION. POR OTRA PARTE, LA DEFICIENCIA EN NITROGENO PROVOCA UNA PARALIZACION DEL CRECIMIENTO CELULAR PERO LOS NIVELES DE NITRITO REDUCTASA SIGUEN AUMENTANDO DE MANERA SIMILAR A LAS CELULAS CRECIDAS EN NITRATO. LOS NIVELES DEL ENZIMA VARIAN TAMBIEN SEGUN LA DISPONIBILIDAD DE LUZ O DE FUENTE DE CARBONO, POR LO QUE PARECE QUE EL BALANCE N-C REGULA LA SINTESIS DEL ENZIMA. LA NITRITO REDUCTASA DE P. LAMINOSUM SE HA PURIFICADO MAS DE 5000 VECES CON UN RENDIMIENTO DEL 16%, OBTENIENDOSE UNA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE 625 U-MG PROTEINA. EL ENZIMA ES SOLUBLE Y CONSTA DE UNA CADENA POLIPEPTIDICA DE 54 KDA CON UN PI DE 5.6. LAS KM PARA LA FERREDOXINA, EL METIL VIOLOGENO Y EL NITRITO SON 22, 12 Y 40 UM, RESPECTIVAMENTE, AUNQUE HAY VARIACIONES SEGUN EL METODO UTILIZADO. LA TEMPERATURA OPTIMA DE ENSAYO ES DE 50 GRADOS C Y EL PH DE 7.5, SIENDO EL ENZIMA ESTABLE HASTA 40 GRADOS C. EL ESPECTRO DE ABSORCION INDICA LA PRESENCIA DE UN GRUPO HEMINICO, PROBABLEMENTE SIROHEMO.
