Identificación, aislamiento y caracterización de lectinas presentes en el látex de euphorbia trigona mill

• Autores: Judith Villanueva Gonzalez
• Directores de la Tesis: Luis Manuel Quirós Fernández (dir. tes.), Sonia Castañón de la Torre (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea ( España ) en 2012
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Mercedes Renobales Scheifler (presid.), Carlos Garbisu Crespo (secret.), Tomás Girbés Juan (voc.), José Luis Pedraz Muñoz (voc.), David Rodriguez Martinez (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Proteínas
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • Este trabajo tiene como objetivo la identificación, purificación y caracterización de lectinas obtenidas a partir del látex de Euphorbia trigona Mill.Para ello, se extrajo la proteína soluble contenida en el látex de dicha especie y se desarrolló un protocolo de purificación mediante distintas técnicas cromatográficas. Tras la purificación, se obtuvieron tres isolectinas compuestas por dos cadenas polipeptídicas de unos 30 kDa no unidas por puentes disulfuro. La secuenciación por espectrometría de masas mostró péptidos con similitud a lectinas vegetales pertenecientes a la familia RIP (proteínas inactivadoras de ribosomas) tipo II.Se estudió la actividad biológica de las lectinas identificadas, así como su afinidad por azúcares. Para ello, se ensayó la actividad hemaglutinante frente a eritrocitos humanos, de oveja y rata. Dicha actividad se mantenía estable frente al pH y la temperatura. Las lectinas purificadas mostraron afinidad por galactosa y N-acetilgalactosamina. Estas proteínas fueron capaces de reducir la síntesis proteica en sistemas libres de células. Todos estos datos sugerían que las lectinas purificadas pertenecían a la familia RIP tipo II.Paralelamente se realizaron ensayos de citotoxicidad frente a distintas líneas celulares (tumorales y no tumorales). Las tres lectinas purificadas de E. trigona resultaron citotóxicas frente a las líneas tumorales ensayadas mientras que no resultaron activas frente a las no tumorales.