Aplicación de técnicas moleculares a la detección, identificación y tipificación de campylobacter jejuni spp. En alimentos

• Autores: Estíbaliz Mateo Alesanco
• Directores de la Tesis: Aurora Fernández Astorga (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Ramón Cisterna Cáncer (presid.), María Isabel Barcina López (secret.), H. Madden Robbert (voc.), Mª Antonia Ferrús Pérez (voc.), Javier Hernández Haba (voc.)
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• Resumen

  • El objetivo global ha sido aplicar las técnicas moleculares al diagnóstico rápido y seguro en alimentos, así como a la tipificación de Campylobacter spp., prestando especial atención las especies termófilas C.jejuni y C.coli por su mayor implicación en las infecciones humanas transmitidas por esta vía.

    Se diseñó un protocolo de PCR para detección e identificación de Campylobacter.

    Se validó el protocolo de PCR para la detección de Campylobacter en muestras de carne de ave de venta en supermercados, por comparación con las técnicas del cultivo. Se utilizaron las técnicas de genotipificado PCR/RFLP y PFGE según protocolos descritos por CAMPYNET y se estudió la diversidad de C.jejuni y C.coli en estas muestras.

    Se constata la alta incidencia de C.jejuni y C.coli en las muestras. Así mismo llama la atención la gran diversidad de tipos detectada entre los aislamientos de dichas muestras, no pudiéndose detectar un tipo predominante.

    Se observó que la composición del caldo de enriquecimiento Preston favorece selectivamente el crecimiento de C.coli frente al de C.jejuni. Además sus factores selectivos no impiden el sobrecrecimiento de vacilos en algún caso identificados como Eschericihia coli. Por ello, es de interés revisar la composición del caldo Preston.

    La sensibilidad del protocolo de detección de Campylobacter por PCR fue mejor que la del cultivo, pudiéndose confirmar la presencia de Campylobacter bien por cultivo bien por PCR de identificación. Se considera un procedimiento rápido y seguro aplicable en un laboratorio de rutina.