Clonación y expresión de genes implicados en la biosíntesis de poliquétidos de streptomyces halstedii
- Autores: Ana Pereda Lopez
- Directores de la Tesis: José Antonio Salas Fernández (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Oviedo ( España ) en 1992
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Juan Evaristo Suarez Fernandez (presid.), María Rosario Rodicio Rodicio (secret.), María Enriqueta Arias Fernández (voc.), Ramón Santamaría Sánchez (voc.), José Antonio Gil Santos (voc.)
- Materias:
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- Resumen
ESTA TESIS DOCTORAL ESTUDIO UN FRAGMENTO DE ADN PSTI DE 2,6KB QUE HIBRIDA ESPECIFICAMENTE CON ACTI. EN PRIMER LUGAR, SE SECUENCIO Y CARACTERIZO, REVELANDOSE LA EXISTENCIA DE DOS PAUTAS ABIERTAS DE LECTURA COMPLETAS (ORFB Y ORF1) Y OTRAS DOS INCOMPLETAS (ORFA Y ORF2). LAS ORF1 Y ORF2 FORMAN UNA -CETOACIL SINTETASA HETERODIMERICA, CUYO CENTRO ACTIVO ES UN RESIDUO DE CISTEINA. LAS ORFB Y ORFA TIENEN FUNCION DESCONOCIDA HASTA EL MOMENTO.
EN SEGUNDO LUGAR, SE LLEVO A CABO LA EXPRESION OBTENIDO SOLO ERA DETECTADO MEDIANTE EL MARCAJE UTILIZANDO S-METIONINA. AL MODIFICAR LOS TRIPLETES 2 Y 6, PARA ADECUARLOS A UN MEJOR USO DE CODONES PARA E.COLI SE INCREMENTO EL NIVEL DE EXPRESION EN AMBOS CASOS.
EN TERCER LUGAR, SE LLEVO A CABO UN EXPERIMENTO DE DISRRUPCION GENICA EN OTRA ZONA DEL ADN DE, S.HALSTEDII, A LA IZQUIERDA DEL FRAGMENTO ESTUDIADO, DEMOSTRANDOSE QUE DICHO FRAGMENTO TAMBIEN PARTICIPA EN EL PROCESO DE BIOSINTESIS DEL PIGMENTO DE LA ESPORA DE S.HALSTEDII Y CUYA ALTERACION DA LUGAR A UN FENOTIPO LILA.
