La llegada de los antibióticos al tratamiento de la tuberculosis posibilitó su curación, pero a pesar de esto la tuberculosis sigue siendo en la actualidad una de las enfermedades infecciosas con mayor tasa de mortalidad del mundo. Su persistencia está asociada a los problemas socioeconómicos, al aumento de la coinfección con el VIH y al creciente aumento de la resistencia de M. tuberculosis a las drogas antituberculosas como consecuencia del tratamiento inapropiado de la enfermedad.
El conocimiento del perfil de resistencias de todos los aislamientos de Mycobacterium tuberculosis en un área determinada permite adecuar las pautas de tratamiento a la población, aportando información sobre el funcionamiento de los programas de control. Los métodos de sensibilidad in vitro juegan un papel fundamental en la detección de la resistencia de las cepas que circulan y en la selección de la terapia adecuada en pacientes infectados con cepas de tuberculosis multirresistente. Los métodos actuales de referencia para evaluar la sensibilidad de Mycobacterium tuberculosis complex se basan en el método de las proporciones múltiples establecido por Canetti en 1963 y generalmente requieren varias semanas para que se obtengan los resultados.
La epsilometría (Etest) es una técnica cuantitativa para determinar, mediante lectura directa, la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) de los antimicrobianos. Etest es una técnica fácil de realizar, determina los resultados de sensibilidad en aproximadamente una semana y no requiere instrumentos caros por lo que podría ser realizado en países con escasos recursos económicos.
El Etest es un método con amplia difusión en diferentes áreas de la microbiología, y uno de los métodos de referencia para la realización de las pruebas de sensibilidad frente a diferentes microorganismos. En micobacteriología su utilización más extendida es en el campo de las micobacterias atípicas, especialmente en las de crecimiento rápido. Sin embargo, en el caso de Mycobacterium tuberculosis existen pocos trabajos publicados y los resultados no son concluyentes, probablemente motivado porque desconocemos los criterios de interpretación de las CIMs obtenidas por Etest y su equivalencia con respecto a los métodos de referencia.
Para evaluar el potencial del Etest para la detección de sensibilidad en M. tuberculosis hemos realizado este estudio, cuyo objetivo principal es realizar una aproximación para la interpretación de las CIMs obtenidas empleando este método, para la realización de pruebas de sensibilidad a isoniazida, rifampicina, etambutol y estreptomicina en aislamientos clínicos de M. tuberculosis. El objetivo secundario sería evaluar y comparar la metodología fenotípica y la genotípica utilizada en las pruebas de sensibilidad frente a M. tuberculosis, teniendo coºmo referencia el método de las proporciones múltiples.
Se trata de un estudio prospectivo que incluye todas las cepas de M. tuberculosis aisladas en Asturias desde 2004 a 2013 y las cepas de los diferentes controles de calidad de la OMS recibidos a lo largo del estudio. Para las pruebas de sensibilidad se siguieron las directrices CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), realizándose también el método Etest. La valoración de este método se realizó tomando como referencia el de las proporciones múltiples en las cepas de los controles de calidad de la OMS y analizando las variables con el programa Microsoft Excel. Además, y de acuerdo a su disponibilidad a lo largo del tiempo, también se realizaron de forma paralela técnicas moleculares para la detección de resistencias a los fármacos antituberculosos de primera línea.
Pudiendo concluir que en nuestra serie, aplicando para la interpretación del método Etest en aislamientos clínicos los valores de referencia obtenidos a partir de las cepas de los controles de calidad de la OMS, este método evidenció una sensibilidad y especificidad del 100 % para la isoniazida y rifampicina. En el caso del etambutol y de la estreptomicina habría que confirmar con un método de referencia solamente aquellas cepas que presentaran una CIM dentro del rango de incertidumbre evidenciado para estos dos fármacos.
La demora inherente a las pruebas de sensibilidad convencionales hace que el interés por las técnicas moleculares sea cada vez mayor, ya que permiten obtener resultados en cuestión de horas. Sin embargo, aunque la utilidad de las técnicas moleculares es innegable, éstos deben seguir considerándose alternativos a las pruebas de detección de sensibilidad a fármacos basados en métodos fenotípicos.
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