Estrategia de generación aislamiento y caracterización de mutaciones en el mtdna de células de ratón
- Autores: Maria Pilar Bayona-Bafaluy
- Directores de la Tesis: José Antonio Enríquez Domínguez (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2001
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Manuel José López Pérez (presid.), Julio Montoya Villaroya (secret.), Gonzalo París Vicente (voc.), Pedro Muniesa Lorda (voc.), Santiago Rodríguez de Córdoba (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Se conocen numerosas mutaciones en el mtDNA que producen enfermedades en humanos. Es difícil obtener modelos animales de estas enfermedades porque no se puede introducir DNA exógeno dentro de la mitocondria. Por esto, este trabajo describe una estrategia que permite aislar lineas celulares de ratón con mutaciones en el mtDNA. En esta estrategia se realiza en primer lugar una mutagénesis al azar, a continuación se manipula el nº de copias de mtDNA por célula de ratón, utilizando un tratamiento que hemos probado que consiste en crecer clones celulares individuales en glucosa y en galactosa.
Los clones incapaces de vivir en galactosa posiblemente tendrán dañado su sistema OXPHOS. Para comprobarlo se mide su respiración en electrodo de oxígeno.
Para análisis de ábridos se ensaya si se trata de una mutación mitocondrial o nuclear. Hemos aislado numerosos clones con mutaciones mitocondriales que producen defectos OXPMOS que se transmiten con la mitocondria. En el trabajo se describe la mutación causante del fenotípo en seis de ellos.
