Resumen de Mecanismos implicados en la regulación homeostatica y en la resistencia a la apoptosis de células t humanas normales y tumorales
En el presente trabajo se ha estudiado la muerte celular inducida por activación (AICD) en la leucemia T humana Jurkat, sublíneas derivadas (J.RT3-T3.5 Jhp y Jws) y blastos T humanos normales. Se ha comprobado la implicación de FasL y APO2L en el proceso de AICD inducido por PHA o por anti-CD3, además los resultados obtenidos sugieren la participación de algún mensajero de muerte adicional, todavía sin caracterizar. Asimismo, se ha estudiado la AICD en estas células a través de glicoproteínas de superficie distintas del TCR, en concreto CD59. FasL y APO2L son secretados al sobrenadante durante el proceso de AICD en las células Jurkat o blastos T humanos en su forma intacta, no proteolizada, asociadas a una fracción particulada y ultracentrifugable. Se ha caracterizado la localización intracelular de estas proteínas, comprobando que FasL y APO2L se encuentran mayoritariamente almacenados en cuerpos multivesiculares (MVBs) del citoplasma de estas células con un tamaño entre 400 y 600 nm y su secreción está asociada con microvesículas. La ligación de CD59 induce la secreción preferente de APO2L, sobre todo en los blastos T normales.
Se ha caracterizado que las sublíneas hiperproliferativas derivadas de Jurkat generadas previamente en nuestro laboratorio Jhp y Jws son resistentes a la AICD. Esto se correlaciona con la ausencia de expresión en su membrana plasmática tanto de moléculas de activación propias de las células T (CD3, CD2, CD59), como del receptor proapoptótico Fas/CD95. La importancia del sistema Fas/FasL en la AICD se confirma por el hecho de que las sublíneas han perdido también la expresión intracelular de FasL.
Se ha analizado el mecanismo por el que Fas se acumula en el interior celular de las sublíneas proliferativas derivadas de Jurkat. Debido a un fallo en la ruta secretora, Fas es conducido hacia compartimentos lisomonales para su degradación. Esto se correlaciona con la ausencia total de
