Caracterización molecular de aislados clínicos pertenecientes al complejo mycobacterium tuberculosis. Un aporte al estudio de la epidemiologia molecular de la tuberculosis en Venezuela
- Autores: Liselotte Aristimuño Barrios
- Directores de la Tesis: Sofía Samper Blasco (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2007
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Piedad Arazo Garcés (presid.), Maria Jose Iglesias Gozalo (secret.), Isabel Otal Gil (voc.), Esther Pérez Herran (voc.), María José Revillo Pinilla (voc.)
- Materias:
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- Resumen
El primer paso para implementar estudios poblacionales de epidemiología molecular de la Tuberculosis (TB), base fundamental de un sistema de vigilancia y control de la enfermedad, consiste en caracterizar genotipicamente los aislamientos, identificar patrones o genotipos predominantes así como evaluar la diversidad clonal de las cepas que ocasionan enfermedad tuberculosa en una determinada área geográfica.
En Venezuela, el Programa Nacional de Control de la Tuberculosis (PNCT) aplica el esquema de tratamiento acortado estrictamente supervisádo (DOTS/TAES) desde 1.982, sin embargo el sistema de vigilancia de la TB no ha implementado las técnicas de diagnóstico y tipificación molecular. El diagnóstico de TB a escala nacional es realizado mediante la baciloscopiay las pruebas de sensibilidád a los fármacos antituberculosos son realizadas únicamente por el Laboratorio Nacional de Referencia de Bacteriología de la TB (LNR) adscrito al PNCT.
La dínánúca'de transmisión de la TB así como los genotipos y patrones genéticos de resistencia de las cepas de M. tuberculosis circulantes en el país son desconocidos. En esta investigación el principal objetivo fue investigar la biodiversidad genética de 714 aislados clínicos de M. tuberculosis correspondientes a pacientes diagnosticados por el PNCT durante el período 1.998 a 2.004.
Fue utilizada la técnica Spoligotyping para caracterizar molecularmente la totalidad de las cepas e identificar las familias genotípicas prevalentes en la población estudiada, los aislados multírresistentes (MR) fueron tipificados mediante la técnica. RPLP-IS61I0 y fueron detectadas mutaciones en los genes de resistencia a rifampicina (rpoB) e isoniacida (katG).
La caracterización molecular de los aisladas clínicos y la comparación con la base de datos del instituto Paste= de Guadalupe permitió identificar nuevos perfiles de espoligotipos integrados únicamente por cepas de Venezuela. Demostramos que la familia genotípica Latino Americana y Mediterránea (LAM) se encuentra ampliamente distribuida en el país y las sub-familias LAM-2 (SIT 17), LAM-9 (SIT 42) y LAM-5 (SIT 93) constituyen la base estructural de ]a población genética de M.tuberculosis estucada.
El análisis de la delección TbD 1 y las mutaciones en los genes katG463 y gyrA95 de las cepas identificadas con nuevos perfiles de espoligotipos, demostraron la pertenencia al grupo genético 3 (Sreevatsan et al., 1.997) y moderno (Brosch et al., 2.002) de la clasificación filogenética de M.tuberculosis.
Por primera vez se reporta la presencia del genotipo W/Beijing en dos cepas aisladas de pacientes con TB pulmonar multirresistente (MR) en Venezuela y América del Sur presumiéndose que la transmisión local ocurrió a partir de un caso importado desde Perú. La detección de una mutación en el gen gyrA puso de manifiesto la resistencia a fluorquínolonas. La frecuencia y tipo de mutaciones detectadas en los genes de resistencia rpoB y katG, de las cepas MR, fueron similares a las reportadas en estudios internacionales.
Los resultados de esta investigación fueron notificados al PNCT y constituyen un aporte a futuros estudios de Epidemiología Molecular de la TB en Venezuela.
