Determinantes mecanísticos de la reactividad y especificidad de la ferredoxina-nadp+ reductasa de anabaena pcc 7119 por su coenzima
- Autores: José Ramón Peregrina Bonilla
- Directores de la Tesis: Milagros Medina Trullenque (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2009
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Carlos Gómez-Moreno Calera (presid.), Fernando Falo Fornies (secret.), Mireia García Viloca (voc.), Eduardo Ceccarelli Ceccarelli (voc.), Pedro Manuel Nieto Mesa (voc.)
- Materias:
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- Resumen
TANTO EN CIANOBACTERIAS COMO EN CLOROPLASTOS DE PLANTAS SUPRIORES SE ENCUENTRA LA FERREDIOXINA-NADP+ REDUCTASA (FNR), UNA ENZIMA FOTOSINTÉTICA QUE CATALIZA LA TRANSFERENCIA DE DOS ELECTRONES DESDE DOS MOLÉCULAS DE FERREDOXINA (FD) A UNA MOLÉCULA DE NADP+, SIENDO LA GENERACIÓN DE ESTE POTENCIAL REDUCTOR EL ÚLTIMO PASO DE LA CADENA FOTOSINTÉTICA. LA FNR ES EL PROTOTIPO ESTRUCTURAL DE UNA FAMILIA DE PROTEÍNAS, CON LAS QUE COMPARTE SEMEJANZA ESTRUCTURAL Y NUMEROSAS CARACTERÍSTICAS FUNCIONALES.
EN ESTE TRABAJO SE HA ABORDADO EL ESTUDIO DE LA FNR DE LA CIANOBACTERIA ANABAENA PCC 7119 COMO MODELO DE FUNCIONAMIENTO DE DICHA FAMILIA, CENTRÁNDOSE EN EL ESTUDIO DE LAS REGIONES QUE INTERVIENEN EN EL RECONOCIMIENTO Y EN LA SELECTIVIDAD POR SU COENZIMA NATURAL, EL NADP+. ADEMÁS SE HA ESTUDIADO EL MECANISMO POR EL CUAL SE PRODUCE LA TRANSFERENCIA DE HIDRURO ENTRE LA FNR Y EL NADP+, Y EL EFECTO QUE TIENE EN EL MISMO LA FORMACIÓN DE COMPLEJOS DE TRANSFERENCIA DE CARGA.
LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE TODOS LOS RESIDUOS DE LA REGIÓN DE UNIÓN AL NADP+ INTERVIENEN EN LA SELECTIVIDAD FRENTE AL NAD+, ADEMÁS DE ORIENTAR AL COENZIMA PARA QUE ADOPTE UNA CONFORMACIÓN NECESARIA PARA LA CATÁLISIS. EL RESIDUO Y303 JUEGA UN PAPEL CLAVE EN LA COLOCACIÓN DEL NADP+ EN EL CENTRO ACTIVO PERMITIENDO UNA EFICIENTE TRANSFERENCIA DE HIDRURO ADEMÁS DE FACILITAR LA LIBERACIÓN DEL PRODUCTO.
ESTOS RESULTADOS EXPERIMENTALES SE HAN CONTRASTADO REALIZANDO DINÁMICAS MOLECULARES DE LA FNR LIBRE Y EN COMPLEJO CON EL NADP+ PARA LA ENZIMA SILVESTRE COMO PARA TODOS LOS MUTANTES ESTUDIADOS. ESTO HA PERMITIDO OBTENER UNA POSIBLE DISPOSICIÓN CATALÍTICAMENTE COMPETENTE PARA EL COMPLEJO DE LA FNR SILVESTRE CON EL NADP+.
