Detección de marcadores de DNA en la especie bovina para estudios de cartografía y biodiversidad

• Autores: Inmaculada Martín Burriel
• Directores de la Tesis: María Pilar Zaragoza Fernández (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 1997
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Martín Gutiérrez Martín (presid.), Julio Montoya Villaroya (secret.), Isaías Zarazaga Burillo (voc.), Fernando Gonzalez (voc.), Ingrid Olsaker (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología animal (zoología)
      • Genética animal
  • Ciencias agrarias
    • Ciencias veterinarias
      • Genética
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• Resumen

  • EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA REALIZADO LA CARTOGRAFIA DE 9 LOCI BOVINOS: 4 MICROSATELITES (INRAZARA232, INRAZARA233, IOZARA975 E IOZARA1489) Y 5 GENES (LALBPS, LTF, PAG1B, RBP3 Y BMP1). LOS CUATRO MARCADORES MICROSATELITES SE HAN AISLADO A PARTIR DE COSMIDOS UTILIZANDO LA TECNICA DE SUBCLONACION EN PLASMIDOS Y SECUENCIACION DIRECTA. ESTOS COSMIDOS FUERON PREVIAMENTE LOCALIZADOS FISICAMENTE POR FISH EN LOS SIGUIENTES CROMOSOMAS: INRAZARA232 E INRAZARA 233 (BTA2Q45), IOZARA975 (BTA17Q26) E IOZARA1489 (BTAXQ42-Q43, REGION PSEUDOAUTOSOMICA). EL ANALISIS DE LIGAMIENTO CONFIRMO LA ASIGNACION FISICA DE LOS MISMOS Y CONTRIBUYO A LA ALINEACION Y ORIENTACION DEL MAPA GENETICO DE ESTOS CROMOSOMAS.

    LA CARTOGRAFIA DE LOS GENES ESPECIFICOS BOVINOS SE HA REALIZADO UNA BUSQUEDA EN LAS BASES DE DATOS GENBANK Y EMBL PARA LA IDENTIFICACION DE SECUENCIAS HOMOLOGAS A ELEMENTOS SINE BOVINO Y SECUENCIAS POLI(A). SE HAN ELEGIDO CUATRO SECUENCIAS CANDIDATAS PARA EL ANALISIS DE POLIMORFISMO. EL ANALISIS DE LIGAMIENTO CONFIRMO LA ASIGNACION DEL GEN RBP3 A BTA28 Y EL DE LTF A BTA22, PERMITIENDO EN ESTE ULTIMO CASO LA ALINEACION DE LOS MAPAS FISICO Y GENETICO. ESTE TIPO DE MARCADORES FUERON UTILIZADOS PARA ASIGNAR POR VEZ PRIMERA EL LALBAPS A BTA5 Y PAG1B A BTA29. ESTA ES LA PRIMERA VEZ QUE EL GEN DE LA PAG1B SE LOCALIZA EN EL MAPA GENETICO DE UNA ESPECIE, SU ASIGNACION FUE CONFIRMADA MEDIANTE EL ANALISIS DE UN PANEL DE HIBRIDOS DE CELULAS SOMATICAS.

    EL GEN DE LA BMP1 FUE AMPLIFICADO A PARTIR DE UNA LIBRERIA DE DNA GENOMICO CON ADAPTADORES (TECNICA DE "VECTORETTE"). EL FRAGMENTO AISLADO FUE UTILIZADO PARA LA ASIGNACION FISICA POR FISH A UN PUNTO DE RUPTURA DE HOMOLOGIA EVOLUTIVO (HSA8-HSA9) EN BTA8Q21. LA ASIGNACION A ESTE CROMOSOMA FUE CONFIRMADA UTILIZANDO EL ANALISIS DE UN PANEL DE HIBRIDOS DE CELULAS SOMATICAS Y POR ANALISIS DE LIGAMIENTO.

    FINALMENTE, EN ESTE TRABAJO SE MUESTRA LA CARACTERIZACION DE 24 MICROSATELITES RECOMENDADOS POR LA FAO PARA EL