Determinación del momento de la ovulación como estrategia para incrementar la fertilidad utilizando semen criopreservado en la especie porcina
- Autores: Victoria Luño Lázaro
- Directores de la Tesis: Lydia Gil Huerta (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2014
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Emilio Martínez García (presid.), Noelia González Ortí (secret.)
- Materias:
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- Resumen
Uno de los principales factores que afectan a las tasas de fertilidad es el intervalo entre la inseminación artificial y la ovulación, principalmente cuando utilizamos semen congelado debido a su reducida vida fértil. El principal objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de la incorporación de antioxidantes en los medios de congelación sobre la calidad del semen de verraco criopreservado, a la vez que se evaluaron los patrones de cristalización del moco vestibular, los cambios en la resistencia eléctrica genital y en la temperatura corporal, para utilizarlos como pronosticadores del momento de la ovulación.
En la primera experiencia se evaluaron los diferentes patrones de cristalización encontrados en el moco vestibular y se determinó la posible correlación con los cambios en la resistencia eléctrica vestibular. El valor máximo de resistencia vestibular se alcanzó entre las 12 y 24 horas tras el momento de ovulación en el 83 % de las cerdas. Por otra parte, los patrones de cristalización se clasificaron en 3 grupos en función del grado de cristalización. El máximo nivel de cristalización se determinó entre las 48 y 36 h antes del momento de ovulación, cuando la resistencia vestibular se incrementaba gradualmente. En el momento óptimo de inseminación la resistencia eléctrica aumentó significativamente, mientras que la cristalización del moco vestibular fue mínima.
En la segunda experiencia se analizaron los cambios en la temperatura de la piel de la zona vulvar y auricular y las modificaciones de la resistencia eléctrica a una distancia de 4, 8, y 12 cm de la vulva durante el estro. Se determinaron diferencias en los valores de temperatura medidos en la zona vulvar y auricular durante el periodo peri-ovulatorio. La temperatura medida en ambos lugares disminuyó significativamente (P <0,05) 12 h antes del momento de ovulación. Los valores de resistencia eléctrica determinados a 4 cm de la vulva mostraron cambios significativos durante el estro, los cuales fueron diferentes a los medidos a los 8 y 12 cm de la vulva. Se determinó una correlación negativa entre la temperatura del área vulvar y la resistencia vaginal medida a los 8 y 12 cm de la vulva.
El objetivo de la tercera experiencia fue investigar el efecto protector de dos antioxidantes procedentes de extractos de plantas, la melisa y la yerba mate sobre la calidad del semen epididimario de verraco tras la descongelación. No se determinaron diferencias entre los grupos experimentales en relación a la motilidad, viabilidad e integridad acrosomal, aunque la incorporación de melisa a una concentración de 10 g/l mejoró los parámetros de VCL, STR y ALH tras la descongelación (P <0,05). La suplementación de melisa y yerba mate redujo los niveles de peroxidación lipídica. Sin embargo, únicamente la yerba mate protegió al ADN del daño oxidativo a los 120 min tras la descongelación (P <0,05). Las muestras espermáticas congeladas con 10 g/l de yerba mate mostraron los niveles más bajos de MDA y de espermatozoides con daño oxidativo en el ADN.
En la cuarta experiencia se determinó en el efecto antioxidante del ácido rosmarinico (RA) en la calidad y capacidad de fecundación in vitro del semen de verraco criopreservado. La motilidad total y progresiva fue significativamente mayor en las muestras congeladas con RA que en el control a los 0 y 120 min tras la descongelación (P <0,05). El porcentaje de espermatozoides con la membrana plasmática y acrosomal íntegra fue superior en la muestras suplementadas con 105 ¿M (P <0,05). Los niveles de MDA de las muestras control fueron significativamente mayores que en las muestras congeladas con 105 ¿M RA (P <0,05). Tras la descongelación los porcentajes de ADN oxidado fueron muy bajos y similares entre diluyentes. Sin embargo, a los 120 y 240 min después de la descongelación las muestras espermáticas suplementadas con 105 ¿M RA redujeron el daño oxidativo en el ADN en comparación con los otros diluyentes. Finalmente los porcentajes de penetración fueron mayores en los espermatozoides congelados con 105 ¿M RA (P <0,05), aunque las tasas de monospermia no fueron significativamente diferentes.
En la quinta experiencia, evaluamos la utilidad de los cambios de temperatura durante el periodo peri-ovulatorio como pronosticadores del momento de la ovulación, a la vez que se determinaron las tastas de fertilidad obtenidas tras la inseminación artificial con semen congelado suplementado con RA. La motilidad total y progresiva, la viabilidad y la integridad acrosomal fue significativamente mayor en las muestras con RA que en las muestras control (P <0,05). En todas las cerdas inseminadas se recogieron embriones. Las cerdas inseminadas con RA mostraron un leve incremento en el número de embriones obtenidos comparado con las cerdas inseminadas con las muestras control. Sin embargo, las tasas de fertilidad no mostraron diferencias en ambos grupos experimentales.
