Resumen de Cyp2a6: caracterización fenotípica y genotípica y estudio de la asociación entre fenotipo, genotipo y nivel de exposición interna a mutágenos derivados del tabaco en una población española
Maria Cristina Carcas de Benavides
El tabaquismo es una de las principales causas de morbi-mortalidad evitable en nuestra sociedad (OMS, 2011).
El citocromo P450 2A6 (CYP2A6) tiene un papel relevante en el metabolismo oxidativo de la nicotina y en la bioactivación de las nitrosaminas derivadas del tabaco que son agentes cancerígenos, por lo que diferentes estudios han relacionado a CYP2A6 con el hábito de fumar.
La isoforma CYP2A6 es una enzima polimórfica, que presenta diferentes variantes alélicas con distintos niveles de actividad enzimática, originando diferentes fenotipos. De esta forma, la variante CYP2A6*1B1 da lugar a mayor actividad, el alelo CYP2A6*9A a una actividad reducida, y el alelo CYP2A*4A se asocia a actividad nula (Raunio & Rhanasto-Rilla., 2012). La actividad CYP2A6 puede presentar también variabilidad interindividual, relacionada con factores extragenéticos, tales como el sexo, la edad y/o el origen étnico (Sinués et al, 2008; Parkinson et al, 2004; Soriano et al, 2011).
Las nitrosaminas, contenidas en el tabaco, por activación vía CYP2A6 se transforman en diferentes sustancias electrofílicas que pueden inducir daño a nivel celular e inducir procesos neoplasicos (Hecht., 2008). Teniendo en cuenta que CYP2A6 se expresa en diferentes tejidos, como a nivel de vesical, éste puede activar en la vejiga la NNK y otras nitrosaminas que se eliminan inalteradas en la orina (Stepanov et al, 2008), y de este modo originar un aumento del riesgo de iniciación carcinogénica por una mayor exposición a estas sustancias.
Asímismo, la utilización de métodos de biomonitorización como los estudios de mutagenicidad urinaria, permiten medir diferentes niveles de exposición interna a distintos carcinógenos y con ello establecer la asociación entre la exposición a mutágenos y el riesgo cancerígeno (Kavlock et al, 2009).
El objetivo del estudio fue determinar el grado de asociación entre el fenotipo y el genotipo CYP2A6; y establecer la relación entre el fenotipo y/o el genotipo y el grado de exposición interna a mutágenos derivados del tabaco en fumadores, para determinar si es posible que el genotipo y/o el fenotipo fueran predictivos del riesgo de exposición interna a mutágenos derivados del consumo tabáquico.
La muestra estudiada incluyó a 244 voluntarios, sanos, caucásicos no emparentados, de los cuales 121 eran fumadores. La determinación del fenotipo CYP2A6 le realizamos mediante HPLC utilizando cafeína como sustancia prueba, utilizando como marcador el cociente metabólico Metilúrico (17U)/ Paraxantina /17X), ambos metabolitos de la cafeína obtenidos en orina (Bechtel et al, 2000). El estudio de la mutagenicidad urinaria se llevó a cabo por el test de la microsuspensión, utilizando una cepa de Salmonella Typhimurium TA100 e incorporando enzimas activadores S9-mix (Maron & Ames, 1983). La determinación de las variantes alélicas se llevo a cabo mediante PCR-RFLP.
Nuestros resultados muestran que la edad es un factor asociado a mayor actividad CYP2A6 (p<0.001), mientras que el género no influye. Aunque no se observaron diferencias en la actividad CYP2A6 entre los individuos fumadores y no fumadores (p=0.27), si se hallaron diferencias significativas en relación a la cantidad fumada (p=0.012), lo que sugiere que una mayor actividad CYP2A6 se relaciona con un mayor consumo de cigarrillos/día.
En cuanto a los polimorfismos genéticos, el genotipo *1A/*1B1 es él que se presentó con mayor frecuencia (43.4%) y del mismo modo entre las mutaciones homocigotas el genotipo 1*B1/1*B1 fue el que se presentó con un mayor porcentaje (9%). No aparecieron individuos portadores de los polimorfismos homocigotos CYP2A6*4A y la duplicación del gen (CYP2A6*1X2A). De los cuatro polimorfismos estudiados el polimorfismo CYP2A6*1X2A fue el que con menor frecuencia apareció mutado. Estas frecuencias son similares a las encontradas en otras poblaciones caucásicas (Soriano et al, 2011).
En nuestra población, los genotipo asociados a un metabolismo rápido (*1A/*1X2A, *1A/*1B1 y *1B1/*1B1), están ligados a mayor consumo de cigarrillos/día.
La actividad enzimática CYP2A6, la edad y el número de cigarrillos/día determinan una mayor exposición interna a mutágenos, evaluada por la excreción urinaria de los mismos, mientras que el genotipo CYP2A6 estudiado y el género no influyen en la mutagenicidad urinaria.
Como conclusión los resultados del estudio sugieren que el mayor riesgo de exposicón a mutágenos derivados de las nitrosaminas del tabaco en fumadores lo tendría el grupo de individuos de mayor edad, mayor consumo de cigarrillos por día y con superior actividad CYP2A6.
Palabras clave: Actividad CYP2A6, polimorfismo, mutagenicidad urinaria, tabaco.
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