Resumen de Análisis genético y molecular de diversos aspectos de la morfogénesis e integridad celular de s. cerevisiae
El aislamiento de mutantes autolíticos de levaduras supone un proceso clave para el estudio de la función de la pared celular, y permite la generación de estirpes de interés biotecnológico. En el presente trabajo se han aislado y caracterizado fenotípicamente en profundidad 38 mutantes autolíticos a partir de una estirpe diploide de saccharomyces cerevisiae. Análisis genéticos posteriores mostraron que dos de ellos portan una mutaciones dominantes, uno de ellos dosis-dependiente y el resto de los analizados mutaciones recesivas. Se escogieron dos de estos mutantes, los cuales mostraban importantes defectos morfogenéticos: las estirpes v327 y v918. El primero muestra errores en polaridad celular, septación, esporulación y una arquitectura anómala en la pared celular a temperatura no permisiva. Estudios de biología molecular revelaron que este mutante posee una única mutación puntual en el gen cdc10, que codifica una septina, la cual supone un cambio de la glicina en la posición 179 por aspartato. Se han realizado estudios genéticos encaminados a relacionar este gen con otros relacionados con procesos morfogenéticos. El segundo mutante muestra una depolarización del crecimiento que origina células gigantes multinucleadas, que son capaces de esporular en condiciones de estabilización osmótica originando ascas aberrantes de hasta 36 esporas. Hemos demostrado la presencia de zonas débiles en la pared y una reducida capacidad protectora de esta estructura frente a agentes antigunficos, y agresiones físicas y enzimáticas. Mediante rastreo con genotecas hemos aislado los genes pem2 y bem2 por complementación del fenotipo de este mutante, y hemos llegado a la conclusión de que la estirpe v918 posee una única mutación en el gen bem2, que codifica una proteína activadora de la función gtpasa de proteínas g de la superfamilia ras.
