Obtención y caracterización de inmunotoxinas antitumorales basadas en rnasas extracelulares fúngicas

• Autores: Nelson Carreras Sangra
• Directores de la Tesis: Javier Lacadena García-Gallo (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2010
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Mercedes Oñaderra Sanchez (presid.), Álvaro Martínez del Pozo (secret.), Luis Ángel Fernández Herrero (voc.), Marta Bruix Bayes (voc.), María Jesús MartÍnez Hernández (voc.)
• Materias:
  • Química
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • Las ribonucleasas (RNasas) son proteínas capaces de degradar enlaces fosfodiéster, que en la naturaleza son cruciales tanto para el almacenamiento de la información biológica (DNA) como para su transferencia (RNAt, RNAm, RNAr). Se trata de proteínas cuyas funciones son muy variadas no sólo entre los distintos organismos, sino incluso dentro de un mismo individuo. Un grupo importante lo constituyen las RNasas extracelulares fúngicas, que aunque todavía no se ha llegado a profundizar lo suficiente en su investigación como para poder especificar su función biológica, se postula que podrían funcionar como mecanismos de defensa o para la producción de nitratos y fosfatos. Algunas de ellas tienen características intrínsecas muy interesantes para la investigación biomédica, cómo su elevada especificidad de sustrato y su capacidad de interaccionar con las membranas biológicas, que las convierte en citotóxicas. A este grupo de RNasas tóxicas, tan específicas y letales, se las ha bautizado como ribotoxinas. Tras su descubrimiento se ha estudiado la función y estructura de estas RNasas, particularmente de las citotóxicas, comparándolas con sus homólogas no tóxicas para poder indagar en el funcionamiento de cada uno de sus elementos estructu rales. Como si de un estudio cirujano se tratara, se ha ido fijando el carácter de la estructura-función en cada uno de los elementos de dichas RNasas hasta el punto de poder definir la función de elementos estructurales individuales. Mediante ingeniería de proteínas y la síntesis de péptidos se pueden construir mutantes o polipéptidos con actividades minimizadas o potenciadas. Esta carrera científico-técnica permite también el uso de estas proteínas con carácter inmunoterapéutico o de diagnóstico ya que posibilita su modificación y fragmentación para utilizarse como quimeras y/o mutantes optimizados para tal menester. Existen varios posibles usos clínicos, entre ellos, la obtención de variantes hipoalergénicas de las ribotoxinas, que eviten reacciones alérgicas severas, o su empleo como elementos óptimos en el diseño de inmunotoxinas. Esta nueva herramienta terapéutica considera el uso de las RNasas extracelulares fúngicas, dirigidas a una diana que es seleccionada mediante la alta es pecificidad de unión de los anticuerpos. El objetivo de la presente Tesis Doctoral es la optimización del diseño, expresión y purificación de inmunotoxinas basadas en RNasas extracelulares fúngicas, o sus variantes, y fragmentos de anticuerpo...