Identificación y caracterización de antígenos de cryptosporidium parvum con interés en el inmuno-diagnóstico en rumiantes domésticos

• Autores: Enrique Tabarés Rodríguez
• Directores de la Tesis: Luis Miguel Ortega Mora (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Mercedes Gómez Bautista (presid.), Manuel Guzmán Pastor (secret.), José Manuel Bautista Santa Cruz (voc.), María Elvira Ares Mazás (voc.), Emilio del Cacho Malo (voc.)
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• Resumen

  • Cryptosporidium parvum es un protozoo parástio capaz de infectar a un gran número de mamíferos entre los que se encuentra el hombre, siendo una de las principales causas de diarrea de origen parasitario. Las ventajas en el diagnóstico del a utilización de la serología radican en su alta sensibilidad y especificidad y en la posibilidad de trabajar con antígenos indicadores de infecciones recientes o pasadas.

    El estudio de los principales antígenos de C.parvum útiles para el serodiagnóstico de la infección en los rumiantes, se realizó utilizando como modelo una especia -la ovina- y estudiando, mediante "Western blot", los antígenos del ooquiste de C.parvum reconocidos por las IgG específicas de diversos grupos poblacionales. La fracción antigénica de 15 kDa se muestra como un candidato ideal para investigar la presencia de primoinfecciones al ser reconocida por ovinos infectados de diferentes edades y razas y no tener interferencia con los anticuerpos calostrales, ni presentar reacciones cruzada con Eimeria spp. Para la identificación de las proteínas contenidas en la fracción de 15 kDa se desarrollaron genotecas de expresión a partir de cDNA de esporozoítos de C.parvum.

    El cribado se realizó utilizando un suero policlonal obtenido tras la inoculación de un conejo con la fracción proteica de 15 kDa. Se aislaron trece clones, de los cuales ocho, presentaban secuencias homólogas desde su extremo 3'.

    Se tomó para su estudio el clon que había sido un mayor número de veces, realizado la expresión in vivo e in vitro del fragmento de menor tamaño obtenido. El suero policlona anti-Cp15 reconoció las proteínas expresadas por este clon tanto vivo. Estos resultados hacen de este clon un buen candidato para la valoración de sus proteínas de expresión en técnicas inmunodiagnósticas de la cryptosporidiosis en los rumiantes domésticos.