Desarrollo y aplicación de un nuevo marcador molecular para listeria monocytogenes: "multilocus sequence typing". Análisis de la estructura poblacional de la especie
- Autores: Celia Salcedo Peláez
- Directores de la Tesis: Julio A. Vázquez Moreno (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2004
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Julian Perera (presid.), Rafael Rotger Anglada (secret.), Fernando Baquero Mochales (voc.), José Antonio Vázquez Boland (voc.), Pedro Coll Figa (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
Multilocus sequence typing" (MLST) constituye un nuevo marcador molecular recientemente desarrollado para varias especies bacterianas. Este método genotípico de aislados bacterianos hace uso de la secuenciación genética para caracterizar a los alelos presentes en diferentes genes no sometidos a presión selectiva, implicados en el metabolismo bacteriano (genes housekeeping).
La acumulación de cambios de nucleótidos en estos de genes es un proceso relativamente lento y por lo tanto el perfil alélico estable a lo largo del tiempo. Por otra parte el análisis de secuencias genéticas tiene un alto poder de discriminación y permite el intercambio y la comparación objetiva de resultados entre distintos laboratorios vía Internet.
Estas características hacen este método especialmente adecuado para realizar estudios epidemiológicos a largo plazo así como para analizar la estructura poblacional de las poblaciones bacterianas.
El desarrollo de MLST para Listeria monocytogenes se llevó a cabo empleando una muestra genéticamente heterogénea de 84 aislados en la que los serotipos 4b, 1/2a, 1/2b y 1/2c estuvieron representados. Esta muestra fue elegida a partir de 360 aislados de origen clínico y alimentario previamente caracterizados mediante electroforesis en campo pulsado (PFGE). Así mismo este análisis permitió identificar los diferentes clones que circulan y producen casos de listeriosis en nuestro país. La congruencia en las relaciones filogenéticas establecidas a partir de ambos tipos de análisis validó el esquema de MLST desarrollado.
Los resultados de MLST confirmaron la existencia de dos divisiones genéticas principales y mostraron una población con una estructura básicamente clonal.
No obstante, los índices de asociación alélica y las secuencias genéticas obtenidas, indicaron la existencia de procesos de intercambio genético a lo largo de la evolución de la especie. Estos datos sugieren que L.monocytoge
