Resumen de Caracterización génica y funcional del sistema ureasa de rhizobium leguminosarum bv viciae
La ureasa (urea amidohidrolasa E.C.3.5.1.5) cataliza la hidrólisis de urea con producción de amoniaco y CO2. La presencia de actividad ureasa ha sido analizada en Rhizobium leguminosarum bv viciae UPM791, encontrando valores de 300 mU.mg protein-1 en células vegetativas. Niveles más bajos de actividad (ca. 100 mU.mg protein-1) han sido encontrados en bacteroides inducidos por la misma cepa en guisante. El análisis de secuencia de una región de ADN de aproximadamente 9 kb ha permitido identificar los genes estructurales (ureA, ureB y ureC), genes accesorios (ureD, ureE, ureF y ureG), y 5 orfs (orf3, orf5, orf6, orf8 y orf9) codificantes para proteínas de función desconocida. Tres orfs (orf3, orf5 y orf6) corresponden a orfs homólogas de la agrupación génica de la ureasa de Snorhizobium meliloti.orf9 codifica para una potencial proteína transmembrana con un dominio C-terminal de tipo GGDEF. Un mutante en orf9 expresa niveles normales de actividad ureasa en cultivos celulares. UreE, una de las proteínas accesorias, muestra una región rica en histidinas características de proteínas de unión a níquel.
Un mutante afectado en ureE recupera parcialmente su actividad en respuesta a la adición de níquel al medio de crecimiento.
Experimentos llevados a cabo con la finalidad de estudiar la complementación cruzada entre proteínas que unen niquel para la síntesis de ureasa e hidrogenasa (UreE and HypB, respectivamente) indican que estas proteínas no son funcionalmente intercambiables en R.leguminosarum.
