El objetivo de este estudio fue valorar los efectos sobre la motilidad, integridad de la membrana plasmática y acrosomal, grado de capacitación, reacción acrosómica y actividad mitocondrial, presenta la incorporación de distintos crioprotectores a los diluyentes de refrigeración'y congelación del semen canino. Para este fin se realizaron 4 experimentos, en los que los espermatozoides preservados por refrigeración y congelación fueron analizados mediante métodos convencionales y, dependiendo del experimento, pruebas complementarias de valoración de la funcionalidad del espermatozoide, incluyéndose: -motilidad determinada mediante el sistema informático SCA@2002, -integridad de la membrana plasmática determinada por test de endósmosis o por tinción con el fluoroeromo yoduro de propididum (PI) y tinciones de eosina,-integridad del acrosoma determinada mediante la tinción específica Spennac@ o las lectinas fluorescentes de Pisum sativum (PSA) y de Arachis hypogea (PNA), -cstado de capacitación con elortetraciclina (CTC), -actividad mitocondrial por tineión con Rodaminal23 (R123) y -capacidad de experimentar reacción acrosómica mediante incubación con calcio ionóforo A23187 y leetinas fluorescentes. Los resultados obtenidos para cada variable se eon'elacionaron entre si en cada experimento. Para ejecutar estos experimentos, se utilizaron pools de semen obtenidos a partir de la fracción espennática de distintos eyaeulados provenientes de 19 penos entre los 2 y 7 años de edad, de distintas razas y con fertilidad anterior probada. La selección de los eyaeulados se realizó teniendo en cuenta una motilidad total superior al 80%, motilidad progresiva superior al 70% y el porcentaje de anomalías morfológicas inferior al 20%. En el experimento I se valoró la incorporación de aminoácidos al diluyente de refrigeración Tris-fructosa-ácido cítrico y 20% de yema (medio control) y se propuso la rcduceión de la c
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