Resumen de Análisis de los perfiles de expresión de microRNAs en cáncer de mama y de la implicación de la familia miR-200 en metástasis
Esta tesis consiste en el estudio de la regulaci6n por microRNAs del proceso de metastasis de carcinomas ductales invasivos de mama. Hemos encontrado una expresi6n alterada de varios microRNAs en muestras tumorales, incluyendo las familia miR-200 y miR-181, miR-210, miR-101 y miR-lOb, a lo largo de la progresi6n desde tumores primarios a metastasis regionales ya distancia. miR- 7, miR-30, miR-148 y miembros de la familia let-7 se encontraron diferencialmente expresados entre tumores primarios no metastaticos vs primarios metastaticos a ganglios linfaticos. Ademas, los miembros del cluster 1 de la familia miR-200 se econtraban sobreexpresados en las metastasis ganglionares, las cuales mantenfan o tenfan una expresi6n mas elevada de Ecadherina respecto de sus correspondientes tumores primarios. Adicionalmente y de acuerdo con la tendencia observada en los tejidos tumorales, observamos niveles elevados de miR-200b y miR-7 en la sangre de pacientes con metastasis regional o a distancia en comparaci6n con pacientes con tumores primarios no metastaticos en el momenta del diagn6stico.
Centrandonos en la significaci6n biol6gica de la mayor expresi6n de los miembros de la familia miR-200 en asociaci6n con la progresi6n metastatica, utilizamos el modelo celular MCFlOCAlh para inducir la expresi6n de miR-200.
Observamos que miR-200 promovfa una transici6n mesenquima-epitelio que conllevaba la inducci6n de un marcado programa epitelial. Este era acompaiiado de un fuerte incremento de la actividad aldehido deshidrogenasa (ALDH), mayor capacidad de crecimiento en mamoesferas y la transici6n de un immunofenotipo CD44+ CD24- a CD44+ CD24+, lo cual era indicativo de la adquisici6n de caracterfsticas de progenitor luminal por parte de celulas que expresaban miR- 200. Ademas, las celulas MCFlOCAlh que expresaban miR-200 desarrollaron la capacidad de diferenciarse y organizarse en estructuras tubuloalveolares ramificadas similares a las de la mama normal. Se observ6 ademas una mayor capacidad de crecimiento tumoral y de colonizaci6n metastatica in vivo. Ademas de la expresi6n de marcadores epiteliales, la expresi6n de miR-200 result6 en la inducci6n de la expresi6n de marcadores basales y de diferenciaci6n luminal in vitro y de forma mas prominente in vivo. Todo ello refueza la idea de que miR- 200 induce caracteristicas de progenitor luminal asf como de agresividad en celulas tumorales mamarias. A nivel mecanfstico encontramos que la mayor capacidad de autorrenovaci6n promovida por miR-200 era debida en parte a la inhibici6n de su ya conocidad diana ZEB2 asf como de una activaci6n de la ruta de seiializaci6n PI3K-AKT.
Finalmente, la morfologia de los tumores formados in vivo por celulas que expresaban miR-200 recordaba a la de los carcinomas metaplasicos mamarios, por lo que decidimos estudiarlos. De hecho, observamos que el componente epitelial de tumores metaplasicos expresaban niveles significativamente superiores de miR-200 que el componente mesenquimal y ademas, mostraban un perfil de marcadores compatible con el de celulas luminales progenitoras.
En vista de las resultados, proponemos que los microRNAs de la familia miR-200 inducen caracteristicas de celulas progenitoras luminales, las cuales asociadas a un fenotipo epitelial, promueven la capacidad metastatica de las celulas tu morales.
