Resumen de Detección y caracterización de péptidos, proteínas y glicoproteínas como biomarcadores en fluidos biológicos. Aplicación al diagnóstico y seguimiento de diversas patologías
Esta tesis doctoral se ha centrado en el desarrollo de metodologías analíticas adecuadas que permitan la separación, detección, caracterización e identificación de proteínas y metabolitos como biomarcadores de diferentes enfermedades o procesos patológicos. Concretamente, se ha centrado en el análisis de biomarcadores proteicos tales como la transtiretina (TTR), una proteína oligomérica con una gran tendencia a formar agregados amiloides y relacionada con la polineuropatía amiloidótica familiar tipo I (FAP-I), y el antígeno carcinoembrionario humano (CEA), una glicoproteína biomarcadora del cáncer de colon y de la metástasis de hígado (derivada del cáncer de colon). También se ha hecho especial énfasis en el estudio de biomarcadores metabólicos relacionados con la progresión de la enfermedad del Huntington, una enfermedad neurodegenerativa hereditaria caracterizada también por la formación de agregados amiloides.
La dificultad de las metodologías empleadas para el análisis de biomarcadores proteicos y metabólicos reside principalmente en el tratamiento de muestra que se tiene que llevar a cabo para aislar y preconcentrar los compuestos de interés presentes en muestras biológicas complejas (tales como suero y plasma) y en la utilización de técnicas de separación y detección adecuadas que permitan la correcta caracterización de dichos biomarcadores. Por este motivo, se han empleado diferentes estrategias para el análisis dirigido (targeted analysis) y no dirigido (untargeted analysis, global profiling) de biomarcadores proteicos y metabólicos, así como para el análisis de proteínas mediante estrategias de top-down y bottom-up, cada una con sus ventajas e inconvenientes. También se han evaluado diferentes técnicas de separación de alta resolución miniaturizadas como la electroforesis capilar (CE), la cromatografía de líquidos capilar (CapLC) y la movilidad iónica (IM), todas ellas acopladas a la espectrometría de masas (CE-MS, CapLC-MS y IM-MS, respectivamente). En resumen, esta tesis doctoral presenta una visión global de las estrategias analíticas más utilizadas actualmente para el estudio de biomarcadores en el campo de la investigación proteómica y metabolómica, con el objetivo de poder diagnosticar, predecir un debut temprano y proponer nuevas dianas terapéuticas a diferentes enfermedades y procesos patológicos.
