Efecto y mecanismo de acción de la progesterona tras su administración oral en el ratón rd 10: un modelo experimental de retinosis pigmentaria / tesis doctoral presentada por María Soledad Benlloch Navarro ; dirigida por [la] Dra. Dña. María Miranda Sanz [y el] Dr. D. José Miguel Soria López.
- Autores: María Soledad Benlloch Navarro
- Directores de la Tesis: Maria Miranda Sanz (dir. tes.), José M. Soria López (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad CEU - Cardenal Herrera ( España ) en 2016
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Bosch-Morell (presid.), María Muriach Saurí (secret.), M.C. Desco Esteban (voc.)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: Repositorio Institucional CEU
- Resumen
“Efecto y mecanismo de acción de la progesterona tras su administración oral en el ratón rd10: un modelo experimental de retinosis pigmentaria” Se ha demostrado que la progesterona (P4) tiene efectos neuroprotectores en modelos de daño cerebral agudo experimental, pero se sabe más bien poco a cerca de los efectos y mecanismo de acción de las hormonas sexuales esteroideas en modelos animales de Retinosis Pigmentaria (RP). El objetivo de la presente tesis doctoral ha sido demostrar si la P4 tenía un efecto neuroprotector en un modelo animal de RP, el ratón rd10. Además, también se ha estudiado si la acción de la P4 era debida al menos en parte a su capacidad para reducir el daño por estrés oxidativo.
Para ello, tras caracterizar a diferentes días post-natales (PN) nuestro modelo de ratón rd10, se procedió a estudiar la dosis más efectiva de P4 con la cual llevar a cabo los experimentos. De este modo, los ratones C57BL6/J (controles) y rd10, recibieron diferentes dosis de P4 oral (50 mg/kg, 100 mg/kg, 150 mg/kg o 200 mg/kg) en días alternos, comenzando el día PN15 y fueron sacrificados a día PN21. La dosis más efectiva fue la de 150 mg/kg, de este modo el tratamiento con la citada dosis se administró del mismo modo al mencionado anteriormente, con el sacrificio de los ratones a día PN21 (para la mayoría de los estudios) pero también a día PN23 para los estudios de gliosis (GFAP). A su vez, también se estudió el efecto de la P4 en diversos marcadores de inflamación y de estrés oxidativo, tanto por la técnica de HPLC, como por western blot e inmunohistoquímica. Además, se analizó el papel antioxidante de la P4 en un modelo ex vivo de tejido de ratón. Para finalmente, estudiar de forma in vitro el efecto antioxidante de la P4, tras el tratamiento de células ARPE-19 sometidas a un estrés oxidativo con diferentes concentraciones de peróxido de hidrógeno (H2O2) y a distintas concentraciones de H2O2 (0 μM, 500 μM y 750 μM).
Nuestros resultados demuestran que la administración oral de dosis crecientes de P4 a los ratones rd10 tiene un efecto dosis-dependiente, que da lugar al aumento significativo del número de filas de fotorreceptores a día PN21 en la periferia lejana y central de la retina de estos ratones. La dosis de 150 mg/kg disminuye el número de células TUNEL positivas. Además, la P4 administrada a ratones rd10 y controles a una dosis de 150 mg/kg demuestra tener los siguientes efectos: reduce de forma significativa la presencia de la nNOS en los ratones C57 tratados con P4 a día PN21 y aumenta la gliosis reactiva en todas las zonas de la retina de los ratones rd10 tratados y C57 tratados a día PN21. Sin embargo, a día PN23 los ratones rd10 tratados presentan una disminución significativa de la gliosis en comparación con los datos a día PN21. A su vez también existe una disminución significativa de la gliosis en la periferia lejana de la retina de los ratones rd10 tratados respecto de los ratones rd10 sin tratar a día PN23. Además, también hay que destacar que la P4 provoca cambios in vivo en los parámetros de estrés oxidativo al ser administrada a los ratones rd10 y C57: disminuye las concentraciones de GSSG en la retina de los ratones rd10 y aumenta el ratio GSH/GSSG en la retina de los ratones rd10 y C57. Del mismo modo, la administración de P4 reduce de forma significativa las concentraciones de MDA en la retina de los ratones C57 y rd10. Finalmente, resaltar el efecto de la P4 demostrado tanto in vivo como ex vivo (mediante la reducción de los niveles de MDA de forma dosis-dependiente) e in vitro (aumentando la viabilidad de las células ARPE-19 sometidas a un estrés oxidativo por H2O2).
En conjunto, nuestros datos sugieren que los efectos protectores de la P4 podrían estar mediados de forma parcial a través de la disminución de la gliosis, la inhibición del estrés oxidativo y de la apoptosis, conduciendo esto a la mayor supervivencia de los fotorreceptores en los ratones rd10.
