Modulación mediante precondicionamiento isquémico de la respuesta inflamatoria y apoptótica inducida por isquemia-reperfusión en un modelo experimental porcino de autotrasplante pulmonar

• Autores: Sara Zapatero Garcia
• Directores de la Tesis: Emilio Álvarez Fernández (dir. tes.), María Cebollero Presmanes (dir. tes.), Carlos Simón Adiego (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2017
• Idioma: español
• Número de páginas: 147
• Tribunal Calificador de la Tesis: María Cruz García Martín (presid.), Luis Ortega Medina (secret.), Patricia Cruz Pardos (voc.), Luis Olmedilla Arnal (voc.), Nicolás Moreno Mata (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología humana
      • Anatomía humana
    • Inmunología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense (pdf)
• Resumen
  • español

    INTRODUCCIÓN: En diversas situaciones clínicas y quirúrgicas, el pulmón se ve sometido a períodos de isquemia más o menos prolongados con el consiguiente riesgo de producirse un síndrome de isquemia-reperfusión (SIR), que implica una compleja reacción inflamatoria que puede producir edema pulmonar grave y disfunción pulmonar. El precondicionamiento isquémico (PCI) es un método por el cual se somete a un órgano a uno o varios períodos breves de isquemia, previo a una agresión isquémica mayor, con el fin de reducir la extensión del daño por isquemia-reperfusión (IR). Nos planteamos que el PCI sobre el pulmón podría ejercer un efecto protector precoz sobre SIR, y que ésta protección puede ponerse de manifiesto en el tejido pulmonar mediante técnicas histológicas e inmunohistoquímicas.

    MATERIAL Y MÉTODOS: Se diseñó un modelo de autotrasplante pulmonar en cerdo para el estudio del SIR. Se realizaron 16 procedimientos quirúrgicos divididos en 3 grupos: grupo control (CON), grupo de precondicionamiento isquémico (PCI) y grupo de cirugía simulada (SHAM). El protocolo quirúrgico consiste en la realización de una neumonectomía izquierda, lobectomía craneal ex-situ, reimplantación del lóbulo caudal y reperfusión durante 30 minutos. En el grupo PCI, antes de finalizar la neumonectomía, se realiza oclusión de la arteria pulmonar izquierda durante dos períodos de 5 minutos, intercalando 5 minutos de reperfusión entre ellos. Al grupo SHAM, se le realizó exclusivamente una toracotomía. Se realizan determinaciones gasométricas arteriales, hemodinámicas y biopsias de tejido pulmonar a los 30 minutos de la reperfusión. Se realizó un análisis histológico del daño pulmonar (mediante tinción con hematoxilina-eosina) y análisis de expresión inmunohistoquímica de CD68 (para identificar la implicación de células de estirpe monocito-macrófago), proteína quimiotáctica de monocitos-1 (MCP-1) y proteínas relacionadas con la apoptosis como son la caspasa-9 y la proteína Bcl-2.

    RESULTADOS: No se encuentran diferencias destacables de las variables gasométricas y hemodinámica entre grupos. La IR produjo en el tejido pulmonar una reacción inflamatoria, con predominio de células macrofágicas. En el grupo PCI se observa una menor inflamación e infiltrado por macrófagos. Tras la IR observamos un aumento de expresión de células CD68 en los alveolos, y en el grupo PCI, aunque también aumentan, lo hacen en menor medida que en el grupo control. La IR produjo en el tejido pulmonar un aumento de expresión de MCP-1 (mediador responsable de la quimiotaxis de monocitos y macrofágos), pero al aplicar PCI, disminuye su expresión. La IR indujo en los pulmones un aumento de la caspasa-9 (proapoptótica) y en el grupo PCI disminuye la caspasa-9 con respecto al grupo control. El PCI indujo un aumento de expresión de la proteína antiapoptótica Bcl-2 en las células pulmonares, con respecto al grupo sometido a IR.

    CONCLUSIONES: En nuestro modelo, se demuestra que el PCI ejerce una la modulación de la fase temprana del SIR pulmonar, que se manifiesta en los tejidos a los 30 minutos de la reperfusión, tanto en el análisis histológico como mediante técnicas inmunohistoquímicas, mostrando una disminución de la inflamación y la apoptosis en los animales precondicionados.

  • English

    Some clinical and surgical procedures widely used nowadays involve inducing lung ischemia for extended periods of time, with the risk of developing lung ischemia-reperfusion injury (LIRI). This syndrome involves a complex inflamatory response that causes disruption of epithelial and endothelial barriers and leads to severe pulmonary edema and lung dysfunction, thus increasing early postoperative morbidity and mortality. Given its important consequences, there is a growing interest in developing methods to protect the lung from developing LIRI. Ischemic preconditioning (IP) is a method that uses short periods of ischemia on one or more organs prior to prolonged ischemia in order to reduce the extension of the damage caused by IR. There is little evidence of the effect of IP on LIRI. However, its protective effect has been proven on some experimental animal models...