Resumen de Diversidad bacteriana asociada a la zona intermareal del estuario del río Tinto: Aislamiento y propiedades biotecnológicas de aislados microalgales ácido-tolerantes
En este trabajo se ha estudiado por primera vez la zona de influencia mareal en el ecosistema ácido del Río Tinto (Huelva). San Juan del Puerto: es la zona del río más lejana de la desembocadura cuyas características ambientales y geo-químicas varían dos veces al día de acuerdo al ciclo mareal. Se ha analizado la diversidad de la comunidad bacteriana a lo largo de las cuatro estaciones del año con diferencia mareal máxima y mínima y se ha comparado con la zona de La Rábida que se encuentra en la desembocadura del río. Los estudios de biodiversidad muestran la existencia de microorganismos acidófilos en las muestras de marea baja pertenecientes a los géneros Acidocella, Acidobacterium, Acidiphilium y Ferromicrobium, algunos de ellos identificados también en muestras de marea alta. Se han detectado en muestras de baja marea clones de la bacteria desnitrificante oxidadora de hierro del género Acidovorax que no se ha sido localizada en estudios previos en la columna de agua del río. También se han encontrado clones de origen oceánico capaces de resistir las condiciones extremas de pH y concentración de metales en las muestras de baja marea pertenecientes a los géneros: Arcobacter, Methylophaga, Mesorhizobium, Marinobacter, Flavobacterium y Pseudomonas. Así mismo no se han detectado clones de los géneros Marinomonas, Limnobacter y Rhodobacter. Se realiza un análisis de correspondencia (PCA y CCA) integrando las variables ambientales medidas y los resultados del análisis de diversidad biológica. Este estudio muestra una estrecha correlación entre los microorganismos acidófilos, las muestras de baja marea que los contienen y la presencia de metales pesados. La muestras de marea alta a pesar de ser más dispersas muestran un elevado grado de correlación con propiedades ambientales (conductividad, salinidad y pH mayores) y concentración de cloro, lo que indica su clara influencia oceánica.
De los muestreos en san Juan del Puerto en pleamar y bajamar en las estaciones de invierno y primavera y en el de bajamar en otoño, se han obtenido seis aislados microalgales denominados: SJP_EBP_1, SJP_EAP_2, SJP_EBO_3, SJP_EBO_4, SJP_EBI_51 que se han cultivado en medio BG11 a 1 SJP=San Juan del Puerto; E=Eucariota; B=Bajamar; A=Pleamar; P=primavera; O=Otoño, I=Invierno Doctoranda 2 Carlotta Vizioli pH7 y a pH4 y el cultivo SJP_EAI_6. en medio L1 a pH7. Se han caracterizado filogenéticamente utilizando para ello la secuenciación y análisis del gen 18S rRNA y se adscriberon respectivamente a los taxones: Parachlorella sp., Trebouxyphiaceae sp., Tetradesmus obliquus, Coelastrella sp, Stichococcus bacillaris (Clorofitas) y Porphyridium sp. (rodofita).
Se han estudiado dos posibles aplicaciones biotecnológicas de los aislados: por una parte se ha determinado su tolerancia a metales y su posible utilización en la eliminación de metales tales como cadmio, cobre, hierro y plomo del medio ambiente y por otra parte se ha estudiado la capacidad de síntesis biogénica de nanopartículas de plata de cinco de los aislados. y su posible actividad antibacteriana frente a bacterias Gram negativas Escherichia coli ATCC 10536, Klebsiella pneumoniae ATCC 29665 y la Gram positiva Staphilococcus epidermidis ATCC 6538P. Del estudio de la tolerancia de los aislados de microalgas a diferentes concentraciones de cadmio, cobre, hierro y plomo a pHs 4 y 7 se observa que los aislados con mejor tolerancia a cadmio fueron Trebouxyphiaceae sp. y Porphyridium sp. a cobre Coelastrella sp. y Porphyridium sp. a hierro, S. bacillaris y a plomo Trebouxyphiaceae sp. A través de la microscopía óptica, fue posible detectar variaciones morfométricas debidas a la exposición a los metales y en muchos casos la producción de un mucílago extracelular no presente en los controles. Se observó la adsorción a la superficie celular o al mucilago de los metales cadmio y plomo en los cultivos de Parachlorella sp. y Coelastrella sp realizados a pH7 y de hierro en los cultivos de Parachlorella sp. y T. obliquus a pH7 así como para los cultivos de Coelastrella sp. a los pHs 4 y 7. Las clorofitas aisladas en este trabajo mostraron, tanto a pH4 como a pH7, la capacidad de producir extracelularmente nanopartículas de plata. Se ha llevado a cabo el estudio de la cinética de producción y de la estabilidad de las mismas dependiendo de la fase del crecimiento del cultivo de micraolga utilizado. Las nanopartículas producidas en fase estacionaria presentaron mayor estabilidad en todos los casos. La actividad antibacteriana de las nanopartículas sintetizadas a partir de las microalgas aisladas fue mayor frente a S. epidermidis que a E. coli y K. pneumoniae siendo las nanopartículas producidas a partir de los aislados Parachlorella sp. y Trebouxyphiaceae sp. las que mostraron mayor actividad frente a las tres bacterias utilizadas.
