Tipificacion molecular de staphylococcus aureus resistentes a meticilina del hospital de elche

• Autores: M. Jose Alcantara Noalles
• Directores de la Tesis: Gloria Royo García (dir. tes.), Francisco Rodríguez Valera (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Miguel Hernández de Elche ( España ) en 2001
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Concepción Gimeno Carmona (presid.), Juan Carlos Rodríguez Díaz (secret.), Miguel Gobernado Serrano (voc.), Jesús García-Martínez (voc.), Maria Angeles Dominguez Luzon (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Microbiología
      • Antibióticos
      • Bacteriología
    • Biología molecular
  • Ciencias médicas
    • Ciencias clínicas
      • Microbiología clínica
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• Resumen

  • Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) es uno de los principales microorganismos causantes de brotes e infeccion intrahospitalarios. La determinacion de los diferentes clones existentes en un hospital resulta de vital importancia para poder determinar los reservorios, mecanismos de transmision y asi, poder actuar sobre ello.

    Se estudiaron 46 SARM del Hospital de Elche aislados durante 5 años y pertenecientes a dos brotes nosocomiales y a casos esporadicos. Se analizaron mediante tecnicas fenotipicas (antibiograma y fagotipia) y genotipicas: Random Amplified polymorfic DNA(RAPD), electroforesis en campo pulsado (PFGE)y Southern blot, con el fin de determinar la relacion existente entre ellos.

    El antibiograma diferencio 6 patrones diferentes, de los que los mas frecuentes (PR1 y PR2, con multiresistencias asociadas) englobaron el 85% de los aislados.

    La fagotipia directa solo tipificó al 76% de los aislados. Un 96% de los SARM mostro una expresion de la resistencia a meticilina alta, clases III o IV. Entre los 46 estafilococos estudiados, ninguno mostró una sensibilidad disminuida a la vancomicina. Mediante la combinacion de 3 cebadores (AP7,AP5 y AP3) con el RAPD diferenciamos 5 genotipos diferentes, de los que el AAA y el CAA englobaron al 91,5% de los estafilococos. La electroforesis en campo pulsado fue la tecnica mas discriminativa y diferencio 7 genotipos, siendo el A el mayoritario (86% de las cepas). Dentro de este genotipo distinguimos 11 subtipos, de los que el A1 y el A2 aparecen el 45% de las cepas cada uno. El Southern blot con posterior hibridacion con la sonda para el gen mecA diferencio tan solo 3 polimorfismos, mientras que con la sonda para el transposon 554 diferencio 5 polimorfismos.

    Con la combinación de las tecnicas utilizadas, se identificaron 13 clones diferentes entre los Staphylococcus aureus resistentes a meticilina del Hospital del Elche. Teniendo en cuenta sus caracteristicas genotipicas(