Participación de las mitocondrias en la respuesta de defensa de Arabidopsis thaliana frente a la infección de microorganismos patógenos

• Autores: Ada Martínez Ayala
• Directores de la Tesis: Carmen Castresana Fernández (dir. tes.), Yovanny Izquierdo Núñez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2018
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pablo Rodríguez (presid.), Marta Martín Basanta (secret.), Monica Pernas Ochoa (voc.), Óscar Lorenzo Sánchez (voc.), Isabel Allona Alberich (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen
  • español

    Las oxilipinas sintetizadas a través de la ruta iniciada por la acción de las enzimas 9-lipoxigenasas actúan como moléculas señalizadoras durante la activación de la defensa vegetal frente a la infección de patógenos. Dado que sus receptores y mecanismos de acción no han sido descritos, el estudio de mutantes insensibles a oxilipinas (noxy) constituye una importante herramienta para identificar los componentes celulares que intervienen en la señalización de estas moléculas y dilucidar los procesos celulares sobre los que ejercen su acción. En este trabajo se han seleccionado tres mutantes, designados noxy5, noxy23 y noxy54, con objeto de examinar la participación de las proteínas NOXY en la activación de la defensa vegetal frente a la infección de patógenos hemibiotrofos y necrotrofos tales como la bacteria Pseudomonas syringae y el hongo Alternaria brassicicola. El clonaje posicional de estos mutantes reveló que, en los tres casos, los genes afectados codifican proteínas mitocondriales asociadas a la traducción de mensajeros en este orgánulo. Así, la mutación noxy5 fue localizada en el locus At3g02010, que codifica una proteína PPR (PENTATRICOPEPTIDE REPEAT CONTAINING PROTEIN); la mutación noxy23 fue localizada en el locus At1g64880 que codifica la proteína ribosomal S5; mientras que la mutación noxy54 afecta al locus At1g55870 que codifica una exorribonucleasa específica de poli-A. La caracterización de los mutantes noxy5, noxy23 y noxy54 muestra la formación de acúmulos mitocondriales y la alteración de la respuesta al daño mitocondrial, indicando que las proteínas NOXY identificadas regulan la función mitocondrial, tanto en condiciones basales, como en situaciones de estrés.

    El análisis de la respuesta de defensa de los mutantes noxy puso de manifiesto diferencias importantes en relación a la formación de síntomas, al crecimiento de los patógenos y a la activación de la expresión de genes marcadores de las distintas rutas de defensa de la planta. Los resultados obtenidos en estos estudios pusieron de manifiesto el aumento de la susceptibilidad de las plantas noxy5, noxy23 y noxy54 frente a los dos tipos de patógenos examinados, y permiten definir la acción de las proteínas NOXY correspondientes como reguladores positivos de la defensa frente a patógenos hemibiotrofos y necrotrofos. El hecho de que los genes identificados codifiquen proteínas mitocondriales involucradas, directa o indirectamente, en la síntesis de proteínas mitocondriales es particularmente relevante, y apunta a la existencia de nuevos mecanismos de defensa vegetal dependientes de la función de estos orgánulos, que escaparían al clásico antagonismo salicílico-jasmonato.

  • English

    Oxylipins produced by the 9-lipoxygenase pathway act as signaling molecules during the activation of plant defense against pathogen infection. As their receptors and mechanisms of action have not been described, non-responding to oxylipins (noxy) mutants are important tools to identify the cellular components involved in oxylipin signaling and to discover the cellular processes on which they exert their actions. In this work we have selected three mutants, namely noxy5, noxy23 and noxy54, in order to elucidate the participation of NOXY proteins in defense activation against the infection by hemibiotrophic and necrotrophic pathogens such as the bacteria Pseudomonas syringae, and the fungus Alternaria brassicicola. Map-based cloning followed by whole genome sequencing of these mutants showed that, in all three cases, the affected genes encode mitochondrial proteins associated with the translation of messengers in this organelle. Thus, the noxy5 mutation was located at the At3g02010 locus, which encodes a PPR protein (PENTATRICOPEPTIDE REPEAT CONTAINING protein); noxy23 was located at the At1g64880 locus encoding a S5 ribosomal protein; whereas noxy54 affects the At1g55870 locus encoding a poly-A specific exoribonuclease. Characterization of noxy5, noxy23 and noxy54 shows the formation of mitochondrial accumulations, as well as altered responses to mitochondrial damage, in comparison with wild type plants. This indicates that NOXY proteins regulate mitochondrial function in both basal and stress conditions. Analysis of noxy defense responses revealed important alterations regarding symptom formation, pathogen growth and induction of genes from several defense pathways. Results obtained in these studies showed the increased susceptibility of noxy5, noxy23 and noxy54 plants to the two classes of pathogens examined, and allow to define the action of the corresponding NOXY proteins as positive regulators of defense against both hemibiotrophs and necrotrophs. The fact that the identified genes encode mitochondrial proteins which are directly or indirectly involved in mitochondrial translation is particularly relevant, as it points to the existence of new plant defense mechanisms dependent on the function of these organelles, which could escape the classical salicylic-jasmonate antagonism.